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烟碱及其代谢物作为衡量人体烟气暴露程度和区别吸烟者、被动吸烟者及非吸烟者的生物标记物，已经受到流行病学和吸烟与健康研究的广泛重视，建立体液中烟碱及其代谢物的准确分析方法有着重要意义。本论文建立了人体尿液中烟碱及其代谢物的分析方法，包括以下三部分：
一、以Agilent Eclipse XDB C18柱作色谱柱，10 mmol/L（pH 6.8）醋酸铵水溶液和无水甲醇为流动相，梯度洗脱，流速1 mL/min，采用ESI-LC-MS/MS法建立了同时测定尿液中烟碱及其9种代谢物的分析方法。结果表明：在一定浓度范围内，所有分析物的工作曲线线性良好，相关系数（r2）都在0.998以上；相对标准偏差（RSD）在2.1％–17.0％之间，回收率在78.4％–115.6％之间；方法前处理简单，灵敏度较高，适用于测定吸烟者尿液中烟碱及其代谢物。
二、将快速分离液相色谱与三重串连四极杆质谱联用，建立了尿液中烟碱及其9种代谢物的分析方法。样品前处理仅需离心和过滤，以Agilent Eclipse XDB C18为快速分离柱，10 mmol/L（pH 6.8）醋酸铵水溶液和无水甲醇为流动相，进行梯度洗脱，流速1mL/min，质谱分析采用大气压化学电离源，以正离子方式进行多反应监测（MRM）。结果表明，烟碱及其代谢物的回收率在80.2％–116.5％之间，RSD在0.9％–15.9％之间。与上述LC-MS/MS法相比，该法分析时间缩短一倍，灵敏度有所提高。
三、用HLB固相萃取柱对尿液进行净化和富集，洗脱液用氮气吹干后溶于乙酸乙酯，再用BSTFA衍生化和SIM-GC-MS分析，建立了烟碱及其代谢物的定性和定量分析方法。该法回收率在80.9％–108.5％之间，RSD在5.8％–13.6％之间。