【摘 要】
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研究目的:(1)确立合适的肿瘤细胞膜模型和理想的多肽表达系统.(2)应用确立的肿瘤细胞膜模型和多肽表达法,筛选特异性抗肿瘤多肽, 检测筛选多肽的体外抗肿瘤效果,以企建立一种
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研究目的:(1)确立合适的肿瘤细胞膜模型和理想的多肽表达系统.(2)应用确立的肿瘤细胞膜模型和多肽表达法,筛选特异性抗肿瘤多肽, 检测筛选多肽的体外抗肿瘤效果,以企建立一种简便、可靠的寻找抗 非小细胞肺癌多肽的方法.材料与方法:(1)选择穿孔多肽Mast21和MastoparanX作为对照多肽,分别应用噬种 体表达法(phage display)和核糖体表达法(ribosome display)表 达.组建含不同成份和比例脂质作为肿瘤细胞膜模型检测筛选抗肿 瘤多肽的可行性,确立合适的肿瘤细胞膜模型和多肽表达法.(2)利用重组基因技术组建可直接用于体外多肽表达的DNA库,应用确 立的多肽表达法进行表达.将表达的肽库与确立的肿瘤细胞膜模型 接触,筛选出特异结合的多肽,应用MTT法检测筛选的多肽在体外抗 肿瘤效果.结论:(1)噬种体表达法因为是借助于活细胞,存在转化效率和表达多肽本身 对宿主细胞毒性的限制,不适合于穿孔多肽的筛选.核糖体表达法 不受细胞转化效率的限制,对宿主无毒性,是理想多肽表达系统.脂 质体(PE/PS,3:7)是目前发现比较合适的肿瘤细胞膜模型,结合核糖 体表达法,能成功筛选出穿孔多肽.(2)合适的肿瘤细胞膜模型和核糖体表达法,使从肽库中筛选特异抗肿 瘤多肽成为可能.从而有望建立一种简便、可靠的寻找抗肿瘤多肽 方法,开发作用机制完全不同能逃避肿瘤耐药机制的抗肿瘤新药.
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