体外扩增人骨髓间充质干细胞(MSCs)及其免疫抑制特性的研究

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目的 探讨体外无血清培养扩增临床规模人骨髓间充质干细胞(MSCs)及其抑制淋巴细胞增殖的免疫调节特性。 方法 人骨髓MSCs来自12例正常人及恶性血液病患者,采用无血清培养基体外培养。外周血淋巴细胞来自2例正常志愿者。MSCs与单向混合淋巴细胞(MLRs)和双向MLRs共培养,应用二乙酰羧基荧光素-琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记双向MLRs中反应细胞。细胞增殖应用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测,T细胞细胞亚群采用流式细胞术(FCM)分析。 结果 能够从所有26.3±8.8 mL骨髓样本中提取MSCs,其中10例成功扩增。扩增后MSCs表面表达CD105、CD73、CD13、CD90,而不表达骨髓造血细胞的表面抗原。MSCs呈剂量依赖性非MHC限制性抑制同种抗原诱导的淋巴细胞增殖。Th2、Tc2比例降低,Th1、Tc1比例无明显变化;T细胞早期活化标记CD69表达增强;CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Tr)比例增加。
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