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采食量是影响动物生产性能的重要因素之一。目前认为,下丘脑食欲中枢的信号整合在“食欲调控网络”中扮演着重要的作用。下丘脑弓状核促采食神经元能够感应营养物质如葡萄糖、脂肪酸和氨基酸等浓度的变化,从而刺激AgRP蛋白的表达和分泌,参与控制采食和能量平衡。迄今为止,不同脂肪酸对动物采食调控的影响及其机制还不是很清楚。为此,本研究在细胞水平上,以小鼠下丘脑N38细胞为模型,采用Western Blot技术检测不同脂肪酸作用下AgRP蛋白的表达及分泌情况,采用定量PCR技术检测AgRP、CD36以及代谢相关基因mRNA的表达水平,并采用RNA干扰和受体激动剂处理等方法研究和比较不同脂肪酸对炎症信号通路及胰岛素、瘦素信号通路变化的影响。研究结果如下:(1)不同的脂肪酸对N38细胞AgRP的表达和分泌具有不同的影响。其中,100μM的丁酸及油酸、棕榈酸对N38细胞AgRP的表达和分泌无显著影响;而100μM月桂酸、辛酸以及硬脂酸、肉豆蔻酸能够显著促进AgRP蛋白的表达和分泌(P<0.05);而100μM的亚油酸能够抑制AgRP蛋白的表达及分泌(P<0.05)。(2)10μM和50μM的亚油酸能显著抑制N38细胞AgRP蛋白的分泌,当浓度增加到100及300μM时,还能够显著抑制AgRP蛋白的表达(P<0.05);硬脂酸及月桂酸在10、50及100μM均能显著促进AgRP蛋白的表达和分泌(P<0.05)。(3)100μM亚油酸与LPS共处理后,显著逆转了TLR4蛋白及TLR4依赖的炎症通路蛋白JNK/IKKα/β的抑制效应(P<0.05);干扰TLR4后,硬脂酸显著逆转了蛋白TLR4及TLR4依赖的JNK蛋白的表达;而月桂酸也能够逆转TLR4及IKKα/β的促进效应(P<0.05)。表明TLR4通路参与介导了上述脂肪酸对N38细胞AgRP表达和分泌的调节作用。(4)100μM亚油酸能显著增加N38细胞胰岛素及瘦素通路的敏感性(P<0.05),与LPS共处理后,胰岛素及瘦素通路的敏感性降低,从而逆转了AgRP的抑制作用;而100μM的硬脂酸能显著抑制胰岛素及瘦素信号通路(P<0.05),干扰TLR4受体后,显著逆转了IRS/Akt/Fox O1及JAK2/STAT3蛋白降低的效应(P<0.05),从而抑制了AgRP蛋白的促进作用;100μM月桂酸对胰岛素及瘦素通路无显著影响。(5)100μM的亚油酸能够显著降低代谢相关基因CPT1/FAS的表达量,而显著增加CD36 mRNA的表达量(P<0.05);硬脂酸能够显著增加CPT1/FAS及CD36的表达量(P<0.05);100μM的月桂酸对ACCα/FAS/CPT1/UCP2及CD36的表达量均无显著影响。综上所述,不饱和脂肪酸——亚油酸能够TLR4依赖性地抑制炎症通路蛋白的表达,促进胰岛素及瘦素的敏感性,从而降低AgRP蛋白的表达及分泌;而饱和脂肪酸——硬脂酸及月桂酸则通过TLR4介导,促进炎症通路蛋白的表达,抑制胰岛素及瘦素的敏感性,从而增加AgRP的表达及分泌。同时,亚油酸及硬脂酸也可能通过CD36及代谢通路影响AgRP神经元的活性。