【摘 要】
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该论文根据与肺癌发生发展负相关的基因主在肺癌演进过程中失活或表达减少一规律,采用基于PCR的抑制性差减杂交方法,构建了HLF细胞株差减多种人肺癌细胞株的cDNA,并对库的质
【机 构】
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中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所
【出 处】
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中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学
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该论文根据与肺癌发生发展负相关的基因主在肺癌演进过程中失活或表达减少一规律,采用基于PCR的抑制性差减杂交方法,构建了HLF细胞株差减多种人肺癌细胞株的cDNA,并对库的质量进行了相应的鉴定.其后以菌落原位杂交技术对所建的相减库进行正负差异筛选,获得了数个差异表达的cDNA克隆.HLF细胞出售者标明其为人正常肺细胞株, 但在研究人员随工作中证实其实际为仓鼠正常肺细胞株,这给研究人员在筛选中造成了很大的困难.虽然如此,但是对其中一个克隆作的Northerns杂交鉴定, 证明其在正常肺细胞中的表达要赤著高于其在肺癌细胞中的表达.测序表明这是人核糖体蛋白s29的一个同源基因.用RT-PCR的方法首次获得了全长的仓鼠s29cDNA克隆.为进一步研究其功能,将此基因亚克降至真核表达质粒中并导入人肺癌细胞株SPC-A-l中, 实验及重复实验都没能获得可外源基因表达的稳定转染子.由此推测该基因的过量表达可能具有一定的生长抑制作用或者细胞毒性.
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