【摘 要】
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来新发现的一项基因沉默技术,是指双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)特异性抑制体内同源基因表达的过程.2002年RNAi被《Science》评
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来新发现的一项基因沉默技术,是指双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)特异性抑制体内同源基因表达的过程.2002年RNAi被《Science》评为世界十大科技突破之首.目前RNAi主要应用于基础研究,如功能基因组研究、信号转导等.在病毒学领域中,RNAi研究也已取得了一定成果,包括HIV、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒、严重急性呼吸综合征病毒等,RNAi对单股正链RNA病毒抑制作用特点和机理研究的报道较少.因此,深入了解RNAi抑制单股正链RNA病毒复制作用特点对于阐明RNAi作用机理,了解正链RNA病毒的复制机制等具有重要意义.XJ-160病毒是本课题组于1990年在新疆分离的辛德毕斯病毒,该病毒是动物病毒的代表株,属单股正链RNA病毒.我们已经完成该病毒的全基因序列测定及部分结构与功能的研究,并成功构建了该病毒具有感染性的全基因cDNA克隆.由于基因背景清楚,因此XJ-160病毒可以作为系统研究单股正链RNA病毒与RNA干扰相互作用的极有价值的分子生物学工具.本研究在序列特异性、位置效应和量效关系等方面,探讨了RNAi对XJ-160病毒复制的影响,为进一步研究RNAi的抗病毒作用和机制奠定基础.本研究对RNAi抑制XJ-160病毒的复制进行了初步探讨,证明RNAi抑制XJ-160病毒复制作用具有高度的序列特异性和位置效应,并存在量效反应关系.RNAi具有降解XJ-160病毒编码的mRNA和直接降解病毒染色体的双重作用.本研究对于解释RNAi对单股正链RNA病毒复制的干扰作用机理具有极大的借鉴意义.研究中进一步明确了nsp4蛋白在病毒转录和复制过程中的重要作用,为XJ-160病毒结构与功能的研究提供了新的思路.
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