不同HBV感染者PBMC中Tbet、GATa-3、Foxp3、RORγt和Bc1-6表达特征

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背景:CD4+T淋巴细胞在抗感染免疫应答中起重要作用。CD4+T淋巴细胞是异质性群体,与HBV感染相关的具体功能特征尚不完全清楚。  目的:探究不同HBV感染者外周血单个核细胞(PBMC)中Tbet、GATA-3、Foxp3、RORγt和Bcl-6五种CD4+T淋巴细胞亚群特异性转录因子的表达特征,以及Tbet/GATA-3(T/G)和Foxp3/RORγt(R/F)比值变化的意义。  方法:本研究共采集275份外周血样本,分别来自16例急性自限性(AHB)、137例慢性(CHB)和62例隐性自限性(RHB) HBV感染者,以及44例疫苗免疫[HBsAb(+)]和16例未疫苗免疫[HBsAb(-)]的正常人。其中,有部分样本使用rHBcAg进行诱导培养。通过CCK-8法检测细胞增殖情况;采用荧光定量PCR法检测五种转录因子的mRNA表达水平。  结果:五种转录因子在不同HBV感染组中的总体表达水平,除Bcl-6外,均有明显差异,包括T/G和R/F两组比值(P<0.001)。它们在RHB组和HBsAb(+)组相对较高;在CHB组,T/G比值有意义地低于HBsAb(-)组(u=-2.24,P=0.025);RORγt(u=-2.35,P=0.019)和Foxp3(u=-2.50,P=0.012)表达水平均有意义地高于HBsAb(-)组,但R/F比值有意义地低于AHB组和RHB组(u=-2.59,P=0.009和u=-4.32,P<0.001)。经rHBcAg诱导后,HBsAb(-)组类似于未诱导的HBsAb(+)组,五种转录因子均有不同程度地增加,尤其是RORγt和Foxp3有意义地增加(t=-8.48,P<0.01和t=-5.49,P=0.003);在AHB组T/G比值有意义地升高(u=-2.24,P=0.025);在CHB组中,GATA-3和RORγt的表达水平均有意义地降低(u=-3.25,P=0.001和u=-2.45,P=0.014),而Foxp3却有意义地增加(u=-2.10,P=0.035);R/F比值则有意义地降低(u=-4.15,P<0.001)。诱导前后的RHB组和HBsAb(+)组的五种转录因子表达水平变化趋势基本一致,T/G比值均有意义地升高(u=-2.84,P=0.005和u=-2.33,P=0.020)。  结论:在PBMC中五种转录因子Tbet、GATA-3、Foxp3、RORγt和Bcl-6的表达水平及T/G和R/F比值具有不同特征,反映不同HBV感染者具有不同的免疫应答方式;正常机体在首次接触HBV抗原时可能启动了多种免疫反应;RHB组和HBsAb(+)组有相似的免疫应答;T/G比值及Foxp3和RORγt表达水平结合R/F比值的不同变化可能是判断HBV感染结果的指标。
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