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目的:采用病例对照的方法研究外周循环中内皮祖细胞(EPCs)和基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)水平对急性脑梗死发生、发展的影响,探讨其相互之间的关系,为缺血性脑卒中严重程度的评估及预后的预测提供参考。
方法:⑴实验设计采用病例-对照研究,选择2011年8月~2012年4月在广东医学院附属医院神经内科就诊的患者及同期门诊健康体检者共163例为对象,分成3组:卒中组(95例)、对照组(28例)、高危组(40例)。⑵颈动脉彩色超声检测受试者颈动脉内中膜厚度(IMT)、粥样斑块的形态学和颈动脉狭窄程度。⑶将卒中患者按改良TOAST标准[1]进行病因分型,分为动脉粥样硬化血栓形成(AT)、小动脉病变(SAD)、心源性栓塞(CE)和不明原因卒中(SUD)4亚型。⑷NIHSS评分评估患者在卒中急性期神经功能损伤程度;改良Rankin量表(mRS)评估卒中恢复期神经功能修复情况。⑸根据Pullicino公式[2]:病灶体积=最大长径×宽径×MRI扫描阳性层数×层厚×Π/6,计算脑梗死的体积。⑹祖细胞免疫荧光抗体CD34-FITC及CD133-PE标记EPCs,采用流式细胞术(FCM)检测循环EPCs水平。⑺酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定血浆SDF-1α浓度。⑻针对脑梗死患者,分别检测卒中起病时(72h内)和第7d两个时间段外周血EPCs及SDF-1α的水平,其变化率定义为(d7-donset)与donset比值。
结果:①卒中组急性期、对照组、高危组循环EPCs水平(%)分别为0.400±0.329、0.698±0.248和0.279±0.101,3组间差异有统计学意义(P<0.01)。进一步两两比较,对照组EPCs较卒中组和高危组均升高,而卒中组又高于高危组,均呈显著性差异(P<0.05)。②Spearman等级相关分析显示,循环EPCs水平与颈动脉IMT值呈负相关(P<0.01)。③卒中急性期,4个卒中亚型(动脉粥样硬化血栓形成、心源性栓塞、小动脉病变与不明原因卒中)的患者循环EPCs水平比较,存在差异,有统计学意义(P<0.05)。其中,动脉粥样硬化血栓形成型显著低于其它3个亚型(P<0.05)。④根据入院NIHSS评分≥7或<7将卒中患者划分成2组,单变量分析显示:NIHSS评分≥7组的循环EPCs水平(%)显著低于NIHSS评分<7组(0.254±0.239VS0.522±0.345,P<0.01);进一步Spearman等级相关分析显示,卒中患者急性期循环EPCs水平与入院NIHSS评分呈负相关(r=-0.512,P<0.01)。⑤卒中21d对患者进行mRS评分,mRS≤2分患者发病时的循环EPCs水平(%)与mRS>3分患者无差异(0.452±0.388 VS0.348±0.248,P>0.05),而第7d的循环EPCs水平(%)mRS≤2分患者显著高于mRS>3分患者(0.829±0.425VS0.636±0.266,P<0.05)。⑥多元线形回归分析显示:卒中后1周的循环EPCs水平及EPCs变化率均与mRS评分显著相关(P<0.05),其中,EPCs变化率是mRS评分的主要影响因子(Beta=-0.433)。⑦卒中起病时及第7d,循环EPCs水平(%)分别为0.400±0.329、0.734±0.367,差异有统计学意义(P<0.01);血浆SDF-1α浓度(ng/mL)分别为1.749±0.814、3.315±1.366,差异有统计学意义(P<0.01)。经Spearman检验发现,EPCs及SDF-1α变化率呈正相关(r=0.695,P<0.01)。
8.Spearman等级相关分析显示,卒中患者血浆中的SDF-1α浓度与脑梗死体积呈负相关(P<0.01)。
结论:⑴循环EPCs水平与颈动脉粥样硬化的程度及急性脑梗死相关,且低水平循环EPCs可能是动脉硬化型脑梗死的危险因素之一。⑵循环EPCs水平具有预测脑梗死神经功能损伤程度及近期预后的价值。⑶卒中后1周外周血中的EPCs及SDF-1α水平增加,EPCs的动员可能与SDF-1α相关。⑷血浆SDF-1α浓度与卒中的严重程度相关。