论文部分内容阅读
冠心病是危害人类健康和导致死亡的重要疾病之一。冠心病的发生是多因素参与的复杂过程,是环境因素和遗传因素共同作用的结果。在过去的30年中对冠心病的遗传易感性研究主要通过候选基因来进行的。随着高密度SNP图谱的不断完善,单倍型、连锁不平衡的广泛应用,在全基因组范围或以生物通路为基础系统的研究冠心病成为了可能。 氧化－抗氧化和炎症反应逐渐被公认为与冠心病发生发展有着密切的关系。本研究围绕这两个重要生物代谢通路上的115个候选基因共936个SNP位点进行关联研究,首先在293对性别年龄匹配的病人和对照中进行基因分型,发现了58个阳性位点(P＜0.05)。进而在另外1030名病例和764名对照样本中对这些阳性位点进行验证,发现ITGA2中的rs3212556(P=9.20×10-5)、PON1中的rs854563(P=-1.92×10-4)和.THBS2中的rs9283851(P=3.00×10-3)与冠心病存在显著相关。并通过单倍型分析,进一步明确ITGA2和PON1上的两个单倍型区域与冠心病存在显著相关。 2007年多个以欧美人群为研究对象的冠心病全基因组关联研究,发现了数十个新的与冠心病发病相关的遗传变异区域。本研究通过检索、整理已发表的冠心病的GWAS文献,从中选择在其他人群中报道的7个关联的染色体区域:1q41,1p13.3,2q36.3,6q25.1,9p21.3,10q11.21和15q22.33,并在2335名病例和1078名正常对照样本中,对阳性区域内的14个SNPs进行验证。结果显示9p21上6个位点与中国人冠心病相关,其中rs10757274的关联信号最强(P=2.38×10-08,OR=1.34),同时提示1q41和在女性中10q11.21上存在冠心病相关的危险因素。 本研究对前期大量冠心病关联研究的结果进行整理和挖掘,进一步在3222例病例－对照样本中发现APOA5中rs2266788与个体的血浆甘油三酯水平呈显著相关(P=9.50×10-9)。并结合肝脏组织中APOA5的表达水平,开展了APOA5基因表达差异研究,发现C allele与APOA5基因表达降低相关联(P=0.044),且同一个个体中C allele的表达水平明显低于T allele,平均降低27％(P=5.15×10-5)。体外双荧光素酶报告基因检测发现在4种细胞株(7402,7405,Hu7,HepG2)中C allele比较T allele表达能力均降低(23.30％,30.76％,25.24％,30.72％),进一步证实了rs2266788 C allele能明显降低APOA5的表达水平。提示该等位基因可能导致个体血浆甘油三酯水平升高,进而发展为高脂血症,增加其冠心病的患病风险。