新型蚊媒RNA病毒检测方法的建立

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[目的]建立一种新型蚊媒病毒检测体系,运用分子生物学手段快速有效准确的检测出蚊媒样本中所存在的RNA病毒,便于蚊媒病毒的检测以及有关部门对相关蚊媒疾病采取有效措施。[方法]利用白纹伊蚊C6/36对病毒样本进行培养,连续观察CPE现象后,提取RNA后反转录成单链cDNA,再合成双链cDNA,经过酶切、接头连接、产物扩增后测序、序列比对,确定病毒种属。同时,利用荧光RT-PCR方法对相关病毒进行验证性检测。[结果]成功将实验室所培养的病毒检测出来,序列比对后确证病毒的存在,同时能从多种病毒样本混合物种检测到每一种病毒的存在。[结论]该项检测体系能够有效准确的检测出病毒的存在,有利于蚊媒病毒的检测及相应蚊传疾病的防治与控制,为我国人民生命财产安全提供保障。
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