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宫颈癌是女性癌症患者死亡的第二大主要原因，全球每年新增病例超过50多万例，新增死亡病例约27万例。宫颈癌首要原因之一是人乳头瘤病毒(human papillomaviruses，HPV)感染，HR-HPV(high risk-HPV)癌蛋白表达可以引起非编码基因如微小RNA(microRNA，miRNA)的异常调节。miRNA主要通过与靶mRNA的核苷酸序列的碱基配对与互补调控转录后水平的基因表达。 癌症相关的上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition，EMT)有助于增加肿瘤细胞的侵袭性和转移性，影响治疗效果，晚期宫颈癌患者容易发生转移，因此EMT提供了研究宫颈癌发展的新思路。多种细胞因子可诱导肿瘤细胞发生EMT，其中TGF-β是最常用的细胞因子。 本研究通过TGF-β1成功诱导了宫颈癌细胞发生了上皮间质转化，将诱导后的细胞与亲本细胞进行芯片检测发现了多个差异表达的miRNA。经过多次重复实验验证挑选了microRNA-374c-5p作为研究对象，并探究其影响宫颈癌侵袭转移的机制。 研究目的： 筛选与宫颈癌细胞上皮间质转化模型的相关microRNA，并初步探究其靶基因相关的可能机制。 研究方法： 通过基因芯片检测以及qRT-PCR筛选验证TGF-β1诱导后差异表达的miRNA。通过Transwell实验检测细胞的侵袭迁移能力的变化。通过蛋白免疫印迹检测和免疫荧光实验检测EMT相关蛋白E-cadherin，Vimentin的表达变化。通过原位杂交方法检测microRNA在宫颈癌患者的临床样本中的表达变化。通过免疫组化方法检测靶基因的表达差异。通过荧光素酶验证microRNA与靶基因的靶向关系。 研究结果： MicroRNA-374c-5p在TGF-β1诱导之后下调最为明显。升高microRNA-374c-5p的表达水平后E-cadherin表达上调、Vimentin表达下调，细胞EMT发生了逆转，细胞的侵袭迁移能力明显降低。反之在亲本细胞中降低microRNA-374c-5p的表达水平后得到相反的结果。在对microRNA-374c-5p的靶基因的研究中发现，通过靶基因预测软件，荧光素酶报告基因检测以及相关功能实验发现，microRNA-374c-5p可直接靶向FOXC1发生作用。临床样本检测后发现在发生转移的宫颈癌患者中microRNA-374c-5p低表达，而FOXC1呈高表达，二者呈负相关的关系(r=-0.725，P＜0.001)。在对宫颈癌患者的临床预后分析中发现，microRNA-374c-5p低表达，FOXC1高表达的宫颈癌患者预后较差(P＜0.05)。 研究结论： 1.改变microRNA-374c-5p的表达水平，可以有效影响细胞侵袭迁移能力以及EMT的进程。 2.MicroRNA-374c-5p通过靶向FOXC1的表达进一步影响E-cadherin、Vimentin、snail的表达变化从而影响肿瘤细胞的侵袭转移。 3.临床样本检测发现，microRNA-374c-5p与FOXC1表达呈负相关的关系，与宫颈癌患者的转移、临床预后密切相关。 创新点： 1.首次通过TGF-β1成功诱导了宫颈癌细胞的EMT的模型，并通过相关功能实验成功的发现了microRNA-374c-5p与FOXC1在上皮-间质转化进程中的重要作用。 2.MicroRNA-374c-5p可能作为判断宫颈癌患者是否发生转移以及临床预后的新的标记物。