铜污染土壤的木霉强化海州香薷修复研究

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土壤的重金属污染在国内外都非常普遍,重金属对土壤的污染比其对大气和水体的污染更具有隐蔽性、滞后性、累积性和不可逆转性,也不易被感官直接发现。鉴于土壤重金属污染危害的严重性,早期发现及时治理和修复是十分必要的。与传统的物理化学土壤修复技术相比,植物修复技术以其成本低、环境友好等特点成为污染土壤治理行之有效的方法之一,引起了国内外学者的高度重视。但超积累植物生物量低、生长速度慢、受土壤环境影响大、对固定态重金属不易吸收,因此寻找一条既可提高植物修复效率、又能改善土壤生态环境,环境友好且成本低廉的新的微生物强化植物修复途径,将具有重要的理论意义和广阔的应用前景。本论文从不同程度Cu污染土壤中筛选出耐Cu真菌,并根据木霉具有广谱性、安全性、广泛适应性等特点筛选出耐Cu木霉,探讨其生物学特性和耐铜特性,并通过盆栽试验研究耐Cu木霉强化海州香薷修复铜污染的土壤,旨在探索一条更高效、更普遍的微生物强化植物修复重金属污染土壤的途径。主要研究结果如下:1、研究了不同程度Cu污染土壤中可培养真菌的种类、数量,并分离出3株具有Cu抗性的木霉(FS5-H、FS10-C和FS10-G),通过形态学特征、18S rDNA等分析,鉴定FS5-H和FS10-G属于哈茨木霉(Trichoderma harzianum Rifai),FS10-C属于里氏木霉(Trichoderma reesei)。2、鉴于普通的真菌培养基不能快速高效地从重金属污染土壤中筛选出木霉,本研究基于木霉的高抗性和高纤维素酶活性对筛选培养基进行改良,获得了高效筛选重金属污染土壤中木霉的培养基B(即羧甲基纤维素钠15g/L,蛋白胨5g/L,天门冬素1.0g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,KH2PO4 1.0g/L,1%孟加拉红3.3ml/L,1%链霉素3ml/L,微量元素1ml/L)以及改良的马丁氏培养基(即添加60 mg/L链霉素浓度的马丁氏培养基)。培养基B较改良的马丁氏培养基能从Cu污染土壤中更有效的筛选木霉。3、对筛得的3株木霉的耐铜特性进行了研究,发现3株木霉均具有较高的耐Cu能力,在低浓度Cu(≤300mg/L)时具有较高的铜积累率。尤其是FS10-C可以在600mg/L的高浓度铜中生长,在低Cu浓度(100mg/L、200mg/L)下其铜积累率分别可达50.6%、30.3%。进一步研究木霉FS10-C的生物学特性,结果表明木霉的分生孢子萌发和菌丝生长,除需要一定的营养外,对其他条件要求不严格。孢子萌发的温度范围为20-36℃,湿度适宜范围为80%以上,pH值为2-8;菌丝良好生长的温度范围为20-36℃,pH值为5-7,光照影响不大。4、海州香薷种子萌发试验结果表明,木霉FS10-C不同浓度孢子悬液不会抑制海州香薷种子的萌发,5 d其发芽率均达到70%以上,其中100%孢子原液处理的种子发芽率明显高于对照组,最高可达78.3%。盆栽试验结果表明,添加的木霉FS10-C对海州香薷的生物量和铜的吸收量具有较明显的促进作用。在土壤中铜浓度低于400mg/kg时加菌处理的干重较不加菌处理最高可增加72.4%,并且在低铜浓度(100mg/kg)污染土壤中加菌处理的海州香薷地上部分和地下部铜浓度也显著增加,但在高浓度(400 mg/kg)其效果不显著。而在复合污染土壤中添加的木霉FS10-C使海州香薷的生物量高于对照50%以上,尤其是海州香薷地上部生物量增加显著,但地下部变化不明显;修复过程中,添加土壤动物跳虫增加植物生物量和铜吸收量的效果不显著,植株对铜、锌的吸收量相互间趋势一致。
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