四株克雷伯氏菌K-抗原基因簇的破译及多重PCR检测方法的建立

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克雷伯氏菌是自然界中常见的条件致病菌,并且近年来其中的肺炎克雷伯氏菌成为了仅次于大肠杆菌的条件致病菌,主要存在于人以及动物肠道中、呼吸道中及泌尿生殖道中。肺炎克雷伯氏菌可在全身所有的部位发生感染现象,可是发病率最高的地方还是在尿路和呼吸道中。   对于克雷伯氏菌中K-抗原基因簇的研究,非常有利于解析克雷伯氏菌的K-抗原多样性的形成机制。K-抗原特异基因均存在于K-抗原基因簇中,基于特异基因的特异分子标识的筛选,为克雷伯氏菌分子分型系统的建立奠定基础。   在本实验中,鉴定了克雷伯氏菌K3、K50、K54、K57四种抗原的K-抗原基因簇。确立了一种基于K-抗原基因簇特异基因的,检测6种血清型克雷伯氏菌的多重PCR检测方法。我们用77种克雷伯氏菌标准菌株,144株临床菌株和其他种属的6株菌证明了这种方法是有很高的特异性和可重复性的。通过灵敏性的相关试验表明,这种检测方法最低可以检测出基因组DNA至2.5 ng。因此,这种检测治病菌株的多重PCR方法,可以用于相关克雷伯氏菌临床或者环境样品的检测,并且这种方法在流行病学调查中具有非常重要的作用。  
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