【摘 要】
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大豆虫害严重影响了大豆的产量，因此有效防治虫害至关重要。大豆抗虫基因工程则是防治虫害的有效途径之一。
精氨酸酶基因(LeARG2)和苏氨酸脱氨酶基因(LeTD2)是番茄中的
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大豆虫害严重影响了大豆的产量，因此有效防治虫害至关重要。大豆抗虫基因工程则是防治虫害的有效途径之一。
精氨酸酶基因(LeARG2)和苏氨酸脱氨酶基因(LeTD2)是番茄中的两个抗虫基因，本研究将这两个抗虫基因构建到同一植物表达载体上。因为大豆遗传转化周期较长，所以首先将构建好的抗虫载体通过农杆菌介导的花苞浸泡法转入野生型拟南芥Col-0中验证其抗虫性。经过筛选得到转抗虫基因拟南芥纯合株系。对转抗虫基因拟南芥纯合株系的表型初步观察分析表明：抗虫基因的导入没有影响拟南芥的正常生长。下一步将进行抗虫性检测实验。
为了在叶中特异性表达抗虫基因，本研究克隆了叶特异性表达基因PR13.1、CA2、CRK21的启动子和终止子，并将其分别与GUS基因融合，得到表达载体pGⅡ-pCA2-GUS-tCA2、pGⅡ-pCRK21-GUS-tCRK21、pGⅡ-pPR13.1-GUS-tPR13.1。将上述融合基因转入野生型拟南芥Col-0，对筛选得到的转基因株系进行组织化学染色发现，GUS基因在转pGⅡ-pPR13.1-GUS-tPR13.1、pGⅡ-pCRK21-GUS-tCRK21拟南芥株系的叶中特异性表达，而在转pGⅡ-pCA2-GUS-tCA2拟南芥株系的各个部位均无表达。
本实验研究了蔗糖浓度、pH值、培养基固化剂类型及浓度对大豆体细胞胚诱导的影响。结果表明：Williams82在蔗糖浓度为6％，pH5.7时体细胞胚诱导率较高；Jack在蔗糖浓度为6％，pH7时体细胞胚诱导率较高；与其它不同条件的培养及固化剂比，培养基固化剂采用0.4％Gelrite时，Williams82和Jack的体细胞胚诱导率均较高。
农杆菌介导的大豆体细胞胚转化中，筛选到抗性愈伤，但抗性愈伤不能再生成苗。
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