【摘 要】
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O157:H7大肠杆菌是一种新发现的病原菌.常常使用质粒DNA的酶切图谱分析技术,对分离菌株进行分型和分子流行病学分析.根据60株O157:H7大肠杆菌致病性大质粒的HindЩ 酶切图谱,
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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O157:H7大肠杆菌是一种新发现的病原菌.常常使用质粒DNA的酶切图谱分析技术,对分离菌株进行分型和分子流行病学分析.根据60株O157:H7大肠杆菌致病性大质粒的HindЩ 酶切图谱,可将它们分为5个群:A群(42)、B群(12株)、C群(4株)、D群(2株)和E群(1株). 那么,这些质粒DNA酶切图谱的差异是什么原因造成的呢?该文对此进行了研究.为了研究 分子量明显增大或明显变小的片段的DNA序列,将p1128、p998和p1005引物对25的扩增产物 分别与pGEM-T载体连接,转化JM109,分别得到克隆pV25-1128、pV25-998和pV25-1005.引 物对527U/28L从p1128和p998扩增出的片段分别与pGEM-T载体连接,转化JM109,分别得到克隆pV5-1128、pV278-1128、pV5-998和pV278-998.序列测定结果和杂交结果表明:p1128和p998的DNA序列相同.在分离菌株998中含有一个比p998分子量小的质粒,正是这个小质粒导 致了p1128和p998在酶切图谱上表型的不同.根据序列测定结果,鉴定并命名了两个新的插 入序列重复.新发现的插入序列IS1310具有转座活性,而没有检测到IS2404的转座活性.短序列重复(CCTCACA)n附近未发现典型的开放阅读框.可能是这些元件导致了p933、p1128/p998和p1005酶切图谱的普异.通过比较4个O157:H7大肠杆菌致病性大质粒的序列,发现它们 之间有一个明显的进化优势,揭示IS1310在O157:H7大肠杆菌致病性大质粒的进化过程中起 了重要的作用.质粒p1006的序列测定结果表明在O157:H7大肠杆菌中还存在着一个分子量为90kb左右的大质粒.
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