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[研究背景]:非酒精性脂肪肝炎(Non-alcoholic Steatohepatitis,NASH)是非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)病理进程中至关重要的一个阶段,直接影响着初始单纯性脂肪肝的发展趋势以及后期疾病的转归。但是,关于NSAH的病理机制及治疗方案目前尚未完全明确。 [研究目的]:本研究通过高脂饮食诱导NASH大鼠的实验动物模型,观察高脂饮食喂养和应用茵芩清肝汤后大鼠生活习性和体貌特征的改变,在实验2周和4周分别处死实验大鼠,收集肝脏组织和血液标本,肉眼观察肝脏组织的改变,检测血脂、肝功能和细胞因子,具体数据做统计学分析,评价茵芩清肝汤对于NASH大鼠的疗效。基于实验结果,以引起细胞因子白介素-6(Interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)释放的信号传导机制为切入点,探讨茵芩清肝汤治疗NASH的分子机制。 [研究方法]:将40只购自湖北省实验动物中心全部体重在200g±10g范围内的健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,各组分别命名为空白对照组(K组)、模型组(M组)、中药低剂量组(D组)和中药高剂量组(G组),并给每只实验用大鼠做标记以便区分。空白对照组大鼠全程均饲喂普通饲料,另外3组大鼠在适应性喂养后,改为按标准剂量配比的高脂饮食喂养。1周后开始灌胃治疗,具体操作为:空白对照组和模型组大鼠给予生理盐水灌胃,中药高低剂量组(统称为治疗组)则给予不同浓度茵芩清肝汤灌胃,隔天一次。分别于实验第2周和第4周的周末,在每个实验组中随机选择5只大鼠逐一处死,取实验大鼠的血清标本和肝组织标本分开保留,存放于-80℃冰箱,待测。检测大鼠血清甘油三酯(triglyceride,TG)和总胆固醇水平(total cholesterol,TC),肝组织天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)和丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT),IL-6和TNF-α水平,反馈的数据具体做相关的统计学分析。 [研究结果]:①一般情况:模型组和中药高、低剂量组的大鼠体重增加,皮毛粗糙,体重明显大于空白对照组,精神萎靡,日常活动减少。模型组大鼠整个肝脏的色泽呈现土黄色及黄色花斑,切开后见切面油腻,部分有黄白色脂质沉积,肝脏质地较脆,有脂肪变性的典型表现。 ②高脂饮食喂养的大鼠血清 TC、TG值较空白对照组明显升高(P<0.01),经茵芩清肝汤治疗的大鼠较给予生理盐水灌胃治疗的模型组大鼠血清TC、TG值降低(P<0.05),随治疗时间的延长,中药治疗组大鼠的血清TC、TG值逐渐下降,接近于空白对照组,且中药高剂量组效果优于中药低剂量组(P<0.05)。 ③高脂饮食喂养的大鼠肝组织AST、ALT活性值较空白对照组明显升高(P<0.01),经茵芩清肝汤治疗的大鼠较给予生理盐水灌胃的模型组大鼠血清AST、ALT值降低(P<0.05),中药组高剂量效果优于中药低剂量组(P<0.01)。 ④高脂饮食喂养的3组大鼠的 TNF-α、IL-6值较空白对照组明显升高(P<0.01);经茵芩清肝汤治疗的2组大鼠较给予生理盐水灌胃的模型组大鼠血清TNF-α、IL-6值降低(P<0.01),随着治疗时间的延长,中药治疗大鼠血清TNF-α、IL-6值降低且中药高剂量组效果更明显。 [研究结论]:①饲喂高脂饮食大鼠较空白对照组大鼠肝脏组织肉眼形态,血脂、肝功能等发生了异常改变,提示高脂饮食可能对大鼠NASH的发生起到了关键作用。 ②运用茵芩清肝汤灌胃治疗高脂饮食诱导的NASH大鼠,可以降低大鼠血清TC、TG,改善肝功能,降低细胞因子TNF-α、IL-6水平,改善肝脏组织的病理状态,提示茵芩清肝汤可能是通过减少细胞因子的释放,从而在NASH的慢性肝损伤和炎症中对肝脏起到保护作用。