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人工授精技术已经广泛应用于养猪生产，但猪冷冻精液人工授精的使用率仅约1％。与新鲜精液人工授精相比，猪冷冻精液人工授精配种后受胎率降低，窝产仔数减少。冷冻过程使得精子质膜和线粒体膜损伤、膜的通透性发生改变、精子获能样变化以及诱导精子细胞凋亡。尽管在冷冻稀释液成分及冷冻处理程序等方面做了大量研究，但关于猪精子的抗冻机制目前尚不清楚。因此，本研究从细胞凋亡的角度出发，系统分析冷冻保存过程中不同浓度甘油对冷冻-解冻后猪精子质量以及对细胞凋亡信号通路中相关基因表达以及Caspases蛋白酶活性的影响。结果如下: (1)低浓度甘油(2％、3％)处理组，猪精子的活力、活率均显著高于其它浓度处理组(0％、5％、7％、10％、14％)。 (2)2％、3％甘油处理组的BCL-2/BAX比值显著高于其它浓度处理组(0％、5％、7％、10％、14％)。猪精子BCL-2/BAX表达量比值与Fas基因的表达量呈极显著负相关(r=-0.929，P=0.007)。 (3)3％甘油组中的Fas相对表达水平低于0％、2％、5％、7％、14％甘油处理组，且存在显著性差异。2％、3％甘油处理组FasL相对表达量显著低于0％和14％甘油处理组。 (4)3％甘油处理组中C aspas e-1相对表达量显著高于0％、2％、10％甘油处理组。Caspase-2基因在3％、14％甘油处理组的表达量显著低于0％、2％、5％、7％、10％甘油处理组，而2％甘油处理组中Caspase-2的相对表达量显著高于其它甘油处理组(0％、3％、5％、7％、10％、14％)。对于Caspase-6和Caspase-13基因，5％甘油处理组的表达水平显著高于其它甘油处理组(0％、2％、3％、7％、10％、14％)，而10％甘油处理组的表达量显著低于其它甘油处理组(0％、2％、3％、5％、7％、14％)。除10％甘油处理组外，3％甘油处理组中Caspase-8相对表达量显著低于其它浓度(2％、5％、7％、14％)甘油处理组。Caspase-8基因的相对表达量与BCL-2/BAX的比值呈显著性负相关（r=-0.819，P=0.024），而与Fas基因表达量呈显著性正相关（r=0.786，P=0.036）。Caspase-15相对表达量在0％甘油处理组显著高于其它浓度甘油处理组，10％和14％甘油处理组中Caspase-15相对表达水平显著低于其它浓度甘油处理组(0％、2％、3％、5％、7％)。 (5)不同浓度甘油处理均会显著降低精子Caspase蛋白酶活性水平。Caspase-3蛋白酶活性水平在甘油所有浓度处理组间均没有显著性差异。Caspase-6/9蛋白酶活性水平，在2％和3％甘油处理组精子中均显著低于0％甘油处理组，且显著高于5％、7％、10％、14％甘油处理组。3％甘油处理组精子的Caspase-8蛋白酶活性水平显著低于2％、5％和14％甘油处理组，却显著高于7％和10％甘油处理组。Caspase-8蛋白酶活性水平和Fas基因表达量具有显著性正相关（r=0.754，P=0.049）。 (6)0％、3％甘油处理组AnnexinⅤ+/PI+精子占总精子的百分比显著高于2％、5％、7％和10％甘油处理组，而2％、5％、7％和10％甘油处理组间无显著性差异。AnnexinⅤ+/PI+精子占总精子的百分比与Caspase-6/9蛋白酶活性呈显著性正相关（r=0.840，P=0.037）。