【摘 要】
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肿瘤细胞在化疗过程中表现对多种药物的抗性是癌症治疗中遇到的一大障碍.该文采用反义核酸,在抗药性人表皮癌KB细胞中,对导致MDR现象的关键蛋白-P-糖蛋白进行调控.为了对反义
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肿瘤细胞在化疗过程中表现对多种药物的抗性是癌症治疗中遇到的一大障碍.该文采用反义核酸,在抗药性人表皮癌KB细胞中,对导致MDR现象的关键蛋白-P-糖蛋白进行调控.为了对反义核酸的作用效果进行评价,在细胞培养实验中分别针对细胞活性、P-糖蛋白表达和MDR1基因转录建立了MTT、ELISA和RT-PCR等检测方法.从10个片段中筛选出两段分别对应于翻译起始区(3)和蛋白ATP结合位点(9)的反义片段.对这两段天然反义核酸进行浓度、作用方式和毒性研究,并以相应的正义和错义链为对照,结果表明它们在有效效果范围内没有细胞毒性,对抗药性的抑制具有浓度和作用次数相关性,以5μmol/l的浓度处理4次可使细胞抗药性下降50%左右,对照实验表明这种抑制作用具有序列特异性.尝试了DNA嵌入剂N-3-硝基-1,8-萘酰亚胺对反义片段的修饰,在反义片段3的3端通过硫代磷酸盐与带有烷基碘的嵌入剂共价偶联,经高效薄层色谱初步纯化,并用高效液相色谱和紫外吸收对其进行鉴定.初步纯化的嵌合型反义核酸表现出较好的稳定性和抗药性抑制效果(80%).
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