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神经肽F(neuropeptide F,NPF)是昆虫体内非常重要的一种神经肽，通过与其特异性配体神经肽F受体（neuropeptide F receptor, NPFR）结合，完成对昆虫的昆虫的进食、酒精敏感性、攻击行为、繁殖、时控行为和学习能力等诸多生理行为的调节作用。小菜蛾Plutella xylostella是世界性的十字花科害虫，研究NPF/NPFR信号对小菜蛾的生理功能调节机制具有重大的实际意义。本文克隆得到了小菜蛾的NPFR基因，并对其功能进行了初步研究。本研究主要内容包括： ⑴克隆得到小菜蛾PxNPFR基因的全长序列。我们以小菜蛾基因组数据为基础筛选得到了小菜蛾NPFR的EST(express sequence tag)序列，通过cDNA末端快速扩增技术RACE(rapid-amplification of cDNA ends)获得了PxNPFR的cDNA全长序列，PxNPFR总长度为1981bp，开放式阅读框(open reading frame，ORF)长1320bp，共编码439个氨基酸，预测蛋白分子量为50.28kDa。序列分析结果表明，PxNPFR属于GPCR家族，具有典型的七次跨膜结构域，蛋白序列中不包含信号肽序列，说明PxNPFR不是一种分泌蛋白。多序列对比结果表明，PxNPFR编码的氨基酸序列与按蚊和果蝇有较高的相似性，特别是在跨膜区。 ⑵明确了PxNPFR在小菜蛾不同发育时期和不同组织的转录规律。PxNPFR在小菜蛾幼虫和成虫的表达量有显著差异。在幼虫期，随着龄期的增长PxNPFR的表达量逐渐上升，在2龄末期达到最高峰后，会一直维持到4龄;羽化后，PxNPFR的表达量显著上升，并且在雌雄成虫间也有显著的性别分化，雌性成虫PxNPFR的表达量是雄虫的2.5倍以上。在对PxNPFR在各组织分布进行分析后，发现相较于其他组织，PxNPFR在精巢和中肠中的表达量较高。 ⑶探讨了PxNPFR的功能。小菜蛾三龄幼虫被菜蛾盘绒茧蜂Cotesiavestalis寄生后三天，体内的PxNPFR表达量突然上调，这一表达高峰会持续三天;而对照组未被寄生的小菜蛾幼虫PxNPFR在同一时间却会逐渐下调。此时在未寄生的对照组，小菜蛾精巢发育迅速，体积增长十分明显，而被寄生的小菜蛾精巢发育受到抑制，体积增长较少。同时，未被寄生的小菜蛾在三天后逐渐减少进食，开始进入徘徊期(wandering stage)，寻找结茧位置;而被寄生的小菜蛾在寄生后三天后，仍然会保持进食，虫体持续增大，直到第6天才开始进入徘徊期。结合PxNPFR的表达规律，我们认为寄生因子通过上调了PxNPFR的表达，从而抑制了小菜蛾幼虫精巢的发育并延长了小菜蛾的取食阶段。之后，我们通过RNAi的手段，对PxNPFR基因进行特异性沉默，在小菜蛾三龄中期幼虫体内注射约0.2ug的dsPxNPFR，以注射0.2ug的dsGFP作为对照，发现处理组小菜蛾幼虫取食量下降，表现为每天的体重增幅缓于对照组，从而延长了小菜蛾的发育历期，相对于对照组延后12～24h结茧。