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许多革兰氏阴性菌面临不良环境时可能会进入“活的非可培养状态(viablebut non-culturable,VBNC)”以维持生存。当致病菌进入此状态时，在国标规定的检测培养基上不能生长形成菌落，因此可能造成防疫检测上的疏漏，从而对人体健康造成潜在的威胁。本论文主要探讨在低/常温、贫/富营养、高盐等不同的环境条件下，这些因子能否诱导副溶血弧菌(Vibrio parahaemojyticus)O3:K6进入VBNC。
利用平板培养基培养检测可培养细胞，利用流式细胞术检测活细胞和死细胞，二者相结合的方法确定副溶血弧菌是否进入了VBNC状态。同时以在较高温度下短时培养的温度回升法和45℃下60秒短暂处理的热休克法来检测处于VBNC状态的V.parahaemolyticus O3:K6能否恢复至可培养状态。主要研究结果如下：
1.在常温(25℃)下，无论是贫营养MMS-0.5％NaCl培养液还是富营养TSB-3％NaCl培养液的诱导，均无法使副溶血弧菌进入VBNC状态。
2.在低温(5℃)下，V.parahaemolyticus O3:K6在贫营养MMS-O.5％NaCl培养液中培养45天后可培养菌数下降为零，而流式计数的结果显示大约有1.2×105cell/ml存活，说明该菌进入了VBNC状态。富营养TSB-3％NaCl培养液中副溶血弧菌在40天时，平板计数为零，此时的活菌数大约为1.3×104cell/ml，说明该菌也进入了VBNC状态，只是活细胞数量比贫营养低了约一个数量级，但是富营养培养下的细菌大约有1.0×106cell/ml的细胞呈损伤状态。
3.在高盐和贫营养的常温和低温培养条件下，中后期大部分细菌显示已经死亡，但是仍有大约5％的细胞存活，其中部分进入了VBNC状态，并且只需17天。
4.在温度回升实验中，在25℃下培养24h，无法使进入VBNC状态的菌体恢复至可培养状态；在37℃下培养24h时，只有MMS-0.5％NaCl低温条件诱导进入VBNC状态的细胞可复苏，可恢复的浓度只有150CFU/ml，其它的均不能恢复。热休克法亦不能使菌体进行有效复苏。
总之，低温是诱导副溶血弧菌O3:K6进入VBNC状态的有效环境因子，低温下富营养可使大量细菌处于受损状态。在高盐贫营养的胁迫下，尽管有大量的细胞死亡，却仍有少量的细胞处于VBNC状态而存活。