重组小鼠嗜铬颗粒蛋白B原核表达载体pGEX/CgB构建和体外表达分析

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嗜铬颗粒蛋白B(Chromograin B,CgB)存在于内分泌细胞、神经内分泌细胞和某些神经原的分泌囊泡中,是主要的基质蛋白.对调节分泌途径中分泌囊泡的形成有极重要作用.CgB可转位进入细胞核,调节某些基因表达;CgB是生物活性肽的前体分子;新近发现嗜铬颗粒蛋白B基因多态性与躁狂型精神病的发生有着密切联系.为深入研究CgB分子结构与功能关系,本研究运用分子生物学方法克隆了小鼠肾上腺组织中嗜铬颗粒蛋白B mRNA,构建可以表达完整蛋白的原核表达载体,最终表达具有抗原性的重组小鼠嗜铬颗粒蛋白B,为进一步研究奠定了基础.结论:本研究通过应用RT-PCR方法克隆分离大片段CgB mRNA;并克隆了编码小鼠CgB氨基酸全序列cDNA.成功构建重组原核表达质粒pGEX/CgB,诱导表达融合蛋白GST-CgB,方法行之有效,可直接应用于嗜铬颗粒蛋白B抗原的纯化制备.为构建此基因的真核表达模型奠定了基础.
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