ICR小鼠胎仔数变异及生殖相关组织转录组分析

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本实验以遗传背景清晰的ICR远交系小白鼠为研究对象,探讨与排卵数相关的胎仔数变化的分子调控机制。首先通过多胎次的繁殖实验,统计胎仔数在ICR小鼠群体间的变异范围,检验胎仔数在不同胎次间是否具有相关性及胎仔数与排卵数之间的关系,检测雌鼠体重、子宫重和卵巢重量等指标对胎仔数和排卵数的影响。在此基础上,选取自然排卵状态下的小鼠个体分为高、低排卵组。采用RNA-seq技术分别对两组样本的子宫、卵巢、垂体三种组织进行转录组水平研究。  本实验主要结果如下:  1、饲养在同样环境下的ICR小白鼠的胎仔数和排卵数均有较大变异。分别统计检验不同胎次间排卵数的相关性,发现不同胎次间的胎仔数均呈显著正相关,排卵数与第三胎胎仔数间呈显著正相关。  2、ICR小鼠胎仔数、排卵数、子宫重、卵巢重均与雌鼠体重呈显著正相关;排卵数与子宫重和卵巢重呈显著正相关;排卵后右侧卵巢重量及排卵数均显著高于左侧卵巢。  3、转录组数据分析基因表达情况:子宫、卵巢、垂体在高、低排卵组均得到大量共表达基因;根据cutoff值进行筛选,在子宫、卵巢、垂体中分别得到664个,1608个及2020个差异表达基因。  4、子宫与卵巢中均检测到大量嗅觉受体基因(Olfactory receptor)表达,并且部分嗅觉受体基因表达存在显著差异;卵巢中检测到输卵管特异性蛋白(Oviduct-specific glycoprotein,OVGP)基因表达,并且在低排卵组卵巢中显著上调。  5、大量与生殖过程相关的基因在高、低排卵组个体中存在显著表达差异,例如骨形态发生蛋白受体6(Bone morphogenetic protein6, BMP6)在高排卵组垂体中显著下调;促卵泡激素释放激素受体(FSHR)在高排卵组卵巢中显著上调,促卵泡激素释放激素FSHβ在高排卵组垂体中显著上调,并且在垂体、卵巢间可能存在着某种反馈调节机制。  6、对差异表达显著的基因进行信号通路分析发现,其中与免疫有关的BCR、TCR等信号通路中的大部分基因在高排卵组三种组织中均呈下调趋势。GO聚类分析,发现与跨膜转运、离子通道等有关的基因及与新陈代谢相关基因聚类相对较多。  7、部分内参基因在子宫、卵巢和垂体三个组织中的表达水平具有较大差异。例如β-actin, B2M等在卵巢中变化水平甚至接近一倍。  根据以上结果,小鼠胎仔数在不同胎次间存在显著正相关,而且排卵数与胎仔数间也存在显著正相关。转录组分析数据表明小鼠的排卵是多基因调控的复杂生理过程,并且这些基因之间相互影响和制约。
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