【摘 要】
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目的研究甜菜碱（Bet）对高浓度同型半胱氨酸（Hcy）诱导的血管内皮细胞（HUVECs）损伤是否具有保护作用；探讨其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响；测定Bet对SOD活性、MDA含量及上清液中N
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目的研究甜菜碱（Bet）对高浓度同型半胱氨酸（Hcy）诱导的血管内皮细胞（HUVECs）损伤是否具有保护作用；探讨其对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响；测定Bet对SOD活性、MDA含量及上清液中NO含量的影响，探讨Bet是否通过抗氧化作用来拮抗Hcy诱导的HUVECs损伤。方法用含15%胎牛血清的RPMI-1640培养液培养HUVECs细胞株，当细胞融合至80%时，用免疫荧光技术鉴定并传代。培养至第三代后，取对数生长期的细胞分成5组：（1）正常对照组：加入等体积的培养液；（2）Hcy损伤组：1mmol/LHcy；（3）Bet低浓度组：1mmol/L Hcy+10mmol/L Bet；（4）Bet中浓度组：1mmol/L Hcy+25mmol/LBet；（5）Bet高浓度组：1mmol/L Hcy+50mmol/L Bet。各组孵育24h后，采用形态学观察法和MTT法检测细胞的增殖存活；以流式细胞技术检测细胞凋亡率；利用免疫细胞化学法和Western-Blotting法检测细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达量的变化；用相应的试剂盒分别检测细胞中SOD活性、MDA含量以及细胞培养液中NO含量。结果免疫荧光化学法检测显示，细胞呈阳性反应，确保了细胞株来源的可靠性。高浓度的Hcy可明显抑制HUVECs的生长，诱导细胞凋亡。Bet可以降低损伤细胞的生长抑制率和凋亡率，提高Bcl-2蛋白的表达而使Bax的表达明显减少，免疫细胞化学结果与Western-blotting法的结果一致。此外，Bet对高浓度Hcy诱导的HUVECs损伤具有保护作用，Bet可以显著升细胞中SOD的活性、降低MDA的含量，升高NO的含量。结论1高浓度的Hcy可抑制细胞生长，促进细胞凋亡；Bet能够降低凋亡率、增加细胞活性，降低Hcy造成的损伤。2Bet能够升高Bcl-2蛋白表达、降低Bax蛋白表达，通过调控凋亡相关蛋白来抑制Hcy造成的HUVECs凋亡。3Bet可以提高SOD活力，降低MDA含量，增加NO含量，通过抗氧化作用来拮抗Hcy诱导的HUVECs损伤。
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