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目的 1.观察术后疲劳综合征(POFS)老年大鼠海马神经营养因子(NTF)含量动态变化规律。 2.观察在应用人参皂苷Rb1干预后,NTF的变化特点,探讨人参皂苷Rb1的抗疲劳机制。 实验设计和方法 1.实验动物SPF级SD雄性大鼠,体重(650-750g),北京维通利华实验动物有限公司(SCXK京2006-0009)。 2.方法及检测指标将96只老年雄性SD大鼠,称重编号随机分为假手术对照组(C组),POFS模型组(P组)和人参皂苷Rb1干预组(G组),每组再按时间点分为术后6小时、第1、3、7天组。术后对应时间点进行旷场试验,并通过Real-time PCR检测大鼠海马神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA;放射免疫法和蛋白印迹法检测相应蛋白质;电镜观察海马CA1区超微结构变化。 结果 1.模型组(P组)变化规律 P组与C组比,旷场试验中大鼠穿越格子数减少(1d、3d,P<0.01),休息时间延长(3d,P<0.01),NGF mRNA含量降低(6h,P<0.05;1d、3d、7d,P<0.01),其蛋白含量降低(3d,P<0.05); BDNF mRNA含量降低(1d,P<0.01),其蛋白含量降低(6h,P<0.01)。电镜结果显示,P组与C组比,大鼠海马神经元超微结构受损。 2.人参组(G组)变化规律 G组与P组比,旷场试验中大鼠穿越格子数增多(1d、3d,P<0.05), NGFmRNA升高(6h、1d、3d、7d,P<0.01),其蛋白含量升高(6h,3d,P<0.01), BDNF mRNA含量升高(6h,P<0.05;1d,P<0.01),其蛋白含量升高(6h、1d、3d,P<0.01)。电镜结果显示, G组与P组比,大鼠海马神经元超微结构得到相应改善。 3.WB结果 WB结果显示,P组NGF蛋白表达量随时间(6h、1d、3d)延长而增加;第3天,C组、P组、G组NGF蛋白表达量,G组最高,C组和P组未见明显差别。P组BDNF蛋白表达量随时间(6h、1d、3d)延长先增高,后降低;第1天,C组、P组、G组BDNF蛋白表达量,G组最高,C组和P组未见明显差别。 结论 1.术后疲劳综合征老年大鼠海马神经营养因子(NTF)相对于假手术对照组表达降低,神经元存在一定程度损伤。 2.应用人参皂苷Rb1通过增加NTF的表达来促进神经元修复,对术后疲劳综合征有一定改善作用。