【摘 要】
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目的：利用重组腺病毒载体Ad-p27mt介导人突变型p27基因(p27mt)转移，研究突变型p27基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。 方法：采用重组腺病毒载体Ad-p27mt将p27mt
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目的：利用重组腺病毒载体Ad-p27mt介导人突变型p27基因(p27mt)转移，研究突变型p27基因对肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响。
方法：采用重组腺病毒载体Ad-p27mt将p27mt全长cDNA转入到人肝癌细胞系SMMC-7721中，通过流式细胞仪蛋白定量分析检测p27mt基因在蛋白质水平的表达；3H-TdR掺入法及软琼脂集落形成实验检测其对细胞增殖的影响；流式细胞仪检测其对肝癌细胞的细胞周期的影响；流式细胞术、DNA片段分析法、TUNEL法检测其对细胞凋亡的影响。
结果：重组体腺病毒Ad-p27mt在MOI≥50时，可达到100﹪的转导效率。转染后导入p27mt基因的SMMC-7721细胞在蛋白质水平有高水平的p27mt基因表达。其细胞3H-TdR掺入量及集落形成率明显低于对照组(p＜0.05)。p27的高表达能够显著地增加G1期的细胞数，由32.48﹪增加到71.39﹪，差异有显著性(P＜0.01)。Ad-p27mt转染肝癌细胞后，流式细胞术检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰；细胞DNA抽提电泳后发现凋亡特征性梯带；TUNEL法检测凋亡指数分别为58.6±4.3(Ad-p27mt组)及4.5±1.6(空白对照组)，差异有显著性(P＜0.01)。
结论：重组腺病毒载体Ad-p27mt可有效转染肝癌SMMC-7721细胞，其介导的p27mt基因转移可抑制肝癌细胞由G1期向S期过渡，抑制肝癌细胞增殖，诱导肝癌细胞凋亡。p27mt基因可望作为目的基因用于肝癌的基因治疗。这一发现将在探索肝癌的基因治疗方面具有重要意义。
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