【摘 要】
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流感病毒核糖核酸(RNA)聚合酶复合物在病毒生命活动中起着至关重要的作用。它在流感病毒繁殖过程中,既能催化复制病毒中的负链单链RNA基因组,又能催化合成病毒蛋白翻译所必需
【出 处】
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中国科学院研究生院 中国科学院大学
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流感病毒核糖核酸(RNA)聚合酶复合物在病毒生命活动中起着至关重要的作用。它在流感病毒繁殖过程中,既能催化复制病毒中的负链单链RNA基因组,又能催化合成病毒蛋白翻译所必需的病毒信使核糖核酸。本项工作以禽流感病毒聚合酶PA亚基的精细三维晶体结构为基础,通过一系列相关的体内外生化实验,证实了禽流感聚合酶PA亚基具有体外核酸内切酶活性,其通过该活性为病毒在宿主细胞体内的转录提供了带帽子结构的RNA引物,进而保证病毒转录活动的正常进行。PA蛋白上核酸内切酶活性区域的鉴定,不仅进一步明确了流感病毒RNA聚合酶的工作机制,而且为抗禽流感药物的研发提供了可靠的靶点,为流感病毒的防治提供了新的策略。
在完成了PA蛋白核酸内切酶活性鉴定后,我们进一步解析了宿主细胞体内具有抗病毒活性的细胞限制性因子ZAP活性区域(NZAP)的精细三维分子结构。通过对NZAP的结构分析以及相关体内外功能实验分析,我们发现一个位于蛋白表面能特异性识别病毒RNA的口袋状区域。该区域内关键氨基酸残基的突变会导致ZAP蛋白抗病毒活性受到极大抑制,同时结合病毒RNA能力大为下降。另外,实验结果还证实,ZAP蛋白在体内发挥抗病毒活性中依赖于N端活性区域的分子间相互作用状态,而且ZAP蛋白在N端的分子间相互作用是通过第一位至第九位氨基酸残基来介导的。该蛋白晶体结构的解析,对揭示其抗病毒功能发挥的机理解释提供了翔实的原子结构基础,为多种重大疾病的治疗提供理论线索。
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