“白头翁汤”、仔猪大肠杆菌性腹泻与硒相关性研究

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仔猪大肠杆菌性腹泻是由病原性大肠杆菌引起的一种急性高度致死性传染病,其中临床发病率最高和危害性最大的是仔猪黄痢和仔猪白痢,给畜牧业造成了重大损失。中药具有非特异性抗菌作用,残留毒性较低,并且动物一般对它不易产生耐药性,再者,中药治疗仔猪黄白痢的种类较多、成本低、治愈率较高,用中药防治仔猪黄白痢已成为科研、临床防治的主要方法。随着近年来对中药中微量元素的进一步研究发现,其中,微量元素硒在医学领域有着十分重要的生物学意义,并且发现硒与腹泻具有密切联系。白头翁汤在抗菌、抗炎、拮抗内毒素等方面的药理作用已经有文献报道,但是,涉及白头翁汤与血硒水平和自由基水平之间的相关性实验尚缺乏系统研究。本试验基于此,对比研究两种不同制备方式白头翁汤在体外对致病性大肠杆菌的抑菌作用,以及两种制备方式白头翁汤和各单味药硒含量的测定,并在构建仔猪大肠杆菌性腹泻病理模型后,白头翁汤在大肠杆菌性腹泻仔猪模型体内的药效学特征以及对动物体内SOD活性、MDA水平及其血硒水平的影响,探讨现代药理学关于白头翁汤防治仔猪大肠杆菌性腹泻的作用机理。试验采用单因子试验设计,选取18头20日龄的健康仔猪为研究对象,成功构建大肠杆菌性腹泻病理模型后,随机分成6个组,每组3个重复,每个重复1头仔猪。Ⅰ组:灌喂盐酸新霉素15mg/kg.b.w;Ⅱ组:灌喂亚硒酸钠维生素E预混剂0.3mg/kg.b.w:Ⅲ组:灌喂盐酸新霉素15 mg/kg.b.w和亚硒酸钠维生素E预混剂0.3mg/kg.b.w;Ⅳ组:灌喂白头翁汤50 mL/头;Ⅴ组:病理状态下不给药;Ⅵ组:健康对照组。采用SOD试剂盒和MDA试剂盒,氢化物发生-原子荧光光谱分析仪测定不同时间点的SOD活性,MDA水平和血硒浓度。其中血硒浓度最低检测限为0.5μg/L,标准曲线范围为0.0~400.0μg/L,并以Spss13.0软件对所得数据进行分析。试验结果表明:(1)合提“白头翁汤”对仔猪大肠杆菌抑菌圈的直径为1.070 cm,分提“白头翁汤”为0.803 cm;合提“白头翁汤”对仔猪大肠杆菌的MIC为125 mg/mL,分提“白头翁汤”则为250 mg/mL。体现了白头翁汤在抑制大肠杆菌作用方面,制备方法宜采用合提法,效果更佳。(2)通过对“白头翁汤”各成分煎液及不同制备汤剂含硒量的测定,黄柏水煎液>黄连水煎液>秦皮水煎液>白头翁水煎液;白头翁汤的两种制备方法相比较,合提“白头翁汤”的含硒量明显大于分提“白头翁汤”,与这两种不同制备方法得到的“白头翁汤”对仔猪大肠杆菌的MIC值和抑菌圈的直径大小想吻合,前者效果优于后者。(3)仔猪感染致病性大肠杆菌导致腹泻后,其SOD活性明显下降,MDA水平均有所升高;运用药物治疗后,西药组(新霉素)SOD活性无明显变化,MDA水平一直处于较高水平,其原因可能与西药在抗菌治疗过程中诱导了内毒素的释放有关;中药治疗组、硒制剂、硒制剂与西药结合治疗组SOD活性先降低后升高至正常水平。通过对比新霉素,硒制剂,新霉素与硒制剂组合、中药白头翁汤对腹泻仔猪体内SOD活性和MDA水平的影响,得出:中药白头翁汤对体内SOD活性和MDA水平的影响优于新霉素,硒制剂,而与新霉素与硒制剂组合相当。(4)仔猪感染致病性大肠杆菌导致腹泻后,分别应用新霉素、亚硒酸钠+维生素E、亚硒酸钠+维生素E+新霉素、白头翁汤进行治疗,同时设立健康和病理对照组。结果表明,病理状态下不给药,体内各个时间点血硒水平明显低与治疗各组和健康组。在四种治疗方案中,亚硒酸钠+维生素E+新霉素组的效果明显优于单纯使用新霉素和亚硒酸钠+维生素E(P<0.01),而白头翁汤组效果与其差异不显著(P>0.05)。以上结果表明:(1)仔猪大肠杆菌性腹泻的发病率与血硒水平有相关性;(2)血硒水平的调节在仔猪大肠杆菌性腹泻的治疗中有积极地意义;(3)白头翁汤治疗仔猪大肠杆菌性腹泻的机制除传统文献报道的非特异性抗菌作用外,还与调整体内血硒水平有关。
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