论文部分内容阅读
本文在国家高技术研究发展计划(863计划)——“中药新药芩部丹片的临床前研究”基础上，对百部生物碱进行药剂学基础的深入研究，探讨以百部为代表的多基原中药“体外制剂精制化，体内过程明确化”的研究模式，为百部生物碱现代化制剂的开发研究奠定基础。
本文收集不同品种和产地的百部药材，进行了基原鉴定，并测定了药材中总生物碱的含量，含量范围为0.79～2.63％。用正交试验法优选了百部的提取工艺，并首次用HZ004强酸性阳离子交换树脂对提取物进行了精制，精制后平均得膏率为1.18％，浸膏中总生物碱含量55.8％，总生物碱转移率49.8％。优选确定的工艺成功进行了放大中试。
本文用经典的硅胶柱层析法对蔓生百部生物碱进行了分离，得到原百部碱、狭叶百部碱和百部定碱，均为已知化合物。为了可以快速分离出原百部碱单体，采用分析型和半制备型高速逆流色谱法对蔓生百部生物碱进行了分离。
通过对不同品种的百部进行TLC鉴别，发现蔓生和直立百部的TLC鉴别图谱较为接近，但和对叶百部比较差异较大，并且不同产地的对叶百部之间也存在较大差异，故百部生物碱的薄层鉴别要考虑品种和产地的差异。在试验过程中选择原百部碱作为百部药材的指标性成分，并对HPLC测定百部药材中原百部碱的方法进行了考察。结果表明确定的方法灵敏度高，重现性好，操作简单，可以作为百部药材和提取物的质量控制手段。
本文对百部生物碱的药效作用进行了系统的研究。结果表明，对叶百部、直立百部和蔓生百部所含生物碱部分具有明显的镇咳作用，与三种百部提取物的镇咳作用无显著差异；三种百部总生物碱的祛痰作用与生理盐水组比较都有非常显著性差异，其中对叶百部总生物碱和氯化铵阳性对照组比较无显著性差异，具有同样的祛痰作用，但直立百部、蔓生百部总生物碱和氯化铵组比较有显著性差异，祛痰作用弱于氯化铵。经噬菌体裂解法和液体培养法检测，对叶百部生物碱在体外无抗结核菌生长的作用，蔓生百部总生物碱和原百部碱有抗结核菌生长的作用，但作用弱于利福平。
本文首次建立了大鼠、小鼠体内原百部碱的HPLC测定方法，并对蔓生百部不同提取物(醇提物、总生物碱和原百部碱)在大鼠、小鼠体内的药代动力学进行研究。试验结果表明，大鼠静脉注射原百部碱的t1/2(Ke)为1.0h，大鼠灌胃原百部碱和总生物碱的t1/2(Ke)分别为1.1h和1.0h，与静脉注射原百部碱的t1/2无差异，但大鼠灌胃醇提物的t1/2(Ke)为1.5～1.9h，比静脉注射原百部碱的t1/2明显延长，提示醇提物中可能含有影响原百部碱消除的物质。灌胃给药百部生物碱在大鼠体内的生物利用度有较大的性别差异，雄性大鼠的绝对生物利用度只相当于雌性大鼠的14～20％，提示百部生物碱在雄性大鼠体内有较大的首过效应。但灌胃给药百部生物碱在小鼠体内的生物利用度无性别差异，提示大小鼠体内可能含有不同的肝药酶。研究中发现无论是大鼠还是小鼠，灌胃给药蔓生百部粗提物、精制物和原百部碱，绝对生物利用度逐渐下降，提示百部提取物中可能含有促进原百部碱吸收的物质或含有与原百部碱类似结构的成分，在吸收时能饱和代谢原百部碱的酶，减少原百部碱的首过效应。
本文还研究了蔓生百部总生物碱的量效关系、急性毒性和蔓生百部不同提取物的时效关系，结果表明百部生物碱镇咳作用起效快，维持时间短，治疗窗窄(0.06～0.16g/kg)。
通过本文的研究，为百部生物碱新制剂的提供了技术依据，奠定了实验研究基础。根据百部生物碱镇咳作用起效快，维持时间短，治疗窗窄的特点，把百部生物碱制成缓控释制剂后将会大大提高百部生物碱的疗效。本文选择的原百部碱单体具有含量高、易检测和作用强的特点，如果把其开发成有效的、副作用小的一类镇咳药，必将有着广阔的前景。本文优选确定的百部总生物碱制备工艺，具有成本低、质量稳定、可控的特点，具有规模化生产的可行性。这将有助于百部生物碱在外用制剂以及农牧业、环保业等其他行业的推广应用。