【摘 要】
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外源表达蛋白质或多肽十分便于研究其结构与功能的关系.丝状噬菌体作为一个外源表达体系广泛地应用于多肽与蛋白质的表达.该工作首先构建了一个展示在丝状噬菌体表面的多肽文
【出 处】
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中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院
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外源表达蛋白质或多肽十分便于研究其结构与功能的关系.丝状噬菌体作为一个外源表达体系广泛地应用于多肽与蛋白质的表达.该工作首先构建了一个展示在丝状噬菌体表面的多肽文库.该工作的第二部分是以黑曲霉葡萄糖淀粉酶为靶子,筛选表达于噬菌体表面的多肽文库.经过3轮生物淘金法筛选,得到三个特异性结合的噬菌体克隆,分别命名为GB-1,2和3.化学合成了环状多肽KCHFEECLAY,其序列对应于结合力最强的克隆GB-1的N端10个氨基酸残基.我们进一步尝试在丝状噬菌体表面展示蛋白质,以便利用亲和筛选和随机突变相结合来研究结构与功能的关系.我们尝试用毕氏酵母来表达TSL及其突变体.现在的工作已经成功地在毕氏酵母中分泌表达了TSL,重组的蛋白质被糖基化修饰,而且保持了专一性结合半乳糖的活性.
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