邻苯二甲酸二丁酯孕期暴露对雄性大鼠生殖系统的影响

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第一部分邻苯二甲酸二丁酯对胚胎期大鼠睾丸蛋白表达谱的影响目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)母体暴露对胚胎期大鼠睾丸蛋白表达谱的影响,分离并鉴定差异表达蛋白质。方法:孕SD大鼠10只,随机分为2组,妊娠14~18天,实验组和对照组分别予DBP 800mg/(kg·d)、大豆油5ml/d灌胃,妊娠19天取出胚胎大鼠睾丸,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析,筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定。结果:共筛选出33个差异表达蛋白(t≥2.831,p<0.05),其中14个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定,如过氧化物酶6、膜联蛋白V、泛素羧基末端水解酶L1等,这些蛋白主要与细胞凋亡、细胞增殖与分化和信号转导等有关。结论:蛋白质组学是研究DBP的生殖系统发育毒性的有效方法,所鉴定的差异表达蛋白为深入探讨DBP的毒性作用机制提供了依据。第二部分邻苯二甲酸二丁酯诱导大鼠尿道下裂发生的差异蛋白质组分析目的:利用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导大鼠尿道下裂的发生,分离并鉴定尿道下裂与正常大鼠生殖结节中差异表达蛋白,以进一步探讨DBP导致尿道下裂发生的作用机制。方法:孕SD大鼠10只,随机分为2组,妊娠14~18天,实验组和对照组分别予DBP 800mg/(kg·d)、大豆油5ml/d灌胃,出生后3天取实验组尿道下裂雄性仔鼠与对照组正常雄性仔鼠生殖结节,提取总蛋白,进行二维凝胶电泳分离和图像分析,筛选出的差异蛋白质点利用质谱技术进行鉴定。结果:共得到31个差异表达蛋白(t≥2.731,p<0.05),其中17个通过质谱分析和SwissProt蛋白数据库检索得到鉴定,如丙酮酸激酶M2、α-烯醇化酶、膜联蛋白A3等,这些蛋白主要与组织分化和生长调控等有关。结论:蛋白质组学是研究DBP的生殖系统发育毒性的有效方法,所鉴定的差异表达蛋白为深入探讨DBP导致尿道下裂发生的作用机制提供了依据。
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