海南红树林内生拟盘多毛孢多样性及分子系统学研究

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拟盘多毛孢是一类广泛分布的真菌,在已报道的230多种中,大多数都是植物病原真菌。自Espinosa-Garcia等(1990)首次报导枯斑拟盘多毛孢(Pestalotiopsis funerea)是红杉(Sequoia sempervirens (D. Don) Endl.)的重要内生真菌后,已有47种拟盘多毛孢被报道是内生真菌。作为国家自然科学基金项目“红树林内生拟盘多毛孢资源、多样性及系统学研究”的一部分,本论文以海南东寨港红树林自然保护区常见红树植物为材料,开展内生拟盘多毛孢资源、多样性的调查;同时选取代表菌株的ITS序列和beta-tubulin基因进行系统分析,通过分析多个基因片段形成的系统发育树并结合形态学,探讨形态学指标-中间色胞颜色的稳定性在该属分类中的地位。主要研究内容如下:1.海南红树林植物内生拟盘多毛孢的种类鉴定2007年作者选取海南东寨港红树林自然保护区的重要红树林植物,进行内生拟盘多毛孢资源的调查,从11种红树林植物中分离到77个内生拟盘多毛孢菌株,鉴定为28个种。2.海南红树林植物内生拟盘多毛孢的多样性内生拟盘多毛孢的定殖率因红树林植物种类以及器官的不同而不同,如:内生拟盘多毛孢在秋茄(Kandelia candel)枝条和叶片中总定殖率为20%,而在木榄(Bruguiera gymnoihiza (L.) Savigny.)中只有2%;拟海桑(Sonneratia paracaseolaris)枝条中内生拟盘多毛孢的定殖率高于叶片分别为17%、13%,而榄李(Lumnitzera racemosa Willd.)叶片中内生拟盘多毛孢的定殖率却明显高于枝条分别为27%和0。内生拟盘多毛孢的物种组成与植物种类有密切关系,如:秋茄中分离到的内生拟盘多毛孢种类达10种,而从其他红树林植物中分离到2-5种,榄李中只分离到1种。分析海南红树林植物内生拟盘多毛孢的多样性指数发现,内生拟盘多毛孢的物种多样性指数与该植物的内生拟盘多毛孢的均匀度指数无关,而与丰富度指数成正相关。3.内生拟盘多毛孢形态学指标-中间色胞颜色在分类中作用的重新评价本文对分生孢子的中间色胞的颜色进行了系统的研究,通过观察中间色胞颜色在继代培养的变化,发现分生孢子中间色胞颜色类型应该包含两种类型:“浅褐色-橄榄色”和“褐色-煤烟色”,而非“同色”和“异色”,中间色胞的颜色在继代培养中是稳定的。同时,用26个拟盘多毛孢种的45个菌株的ITS序列和beta-tubulin基因序列建立分子系统发育树。在系统发育树上,拟盘多毛孢的45个菌株分成2大类群(X和Y),和分生孢子有色胞的颜色类型“浅褐色-橄榄色”和“褐色-煤烟色”相对应。形态学和分子系统学数据都说明中间色胞的颜色类型在该属的分类中具有非常重要的地位。
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