银杏叶提取物的工艺优化与质量控制

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银杏叶提取物是心脑血管药物及保健品的重要原料,其质量对下游产品有重大影响。中国药典规定银杏叶提取物中总黄酮含量>24%,总内酯含量>6%,总银杏酸含量<10μg/g。由于国内银杏叶提取物市场的无序恶性竞争,使得近十几年来原料银杏叶中黄酮含量急剧下降,造成银杏叶提取物中黄酮含量难以满足药典要求,造假现象层出不穷。而2015版中国药典对银杏酸含量测试方法的修订,导致按照新方法测得的提取物中银杏酸含量严重超标。根据药典规定的工艺路线,使得银杏叶提取物中黄酮和银杏酸含量满足药典要求成为业内当务之急。  本论文采用醇提-大孔树脂纯化工艺制备银杏叶提取物,选取黄酮含量不同的三批银杏叶,考察银杏叶中黄酮含量、提取工艺条件对提取物质量、得率及黄酮提取率的影响,采用统计回归方法分别建立了银杏叶提取物的黄酮含量、提取物得率及黄酮提取率与大孔树脂纯化乙醇浓度和体积之间的关系;考察了树脂类型及大孔树脂洗脱工艺条件对银杏叶提取物中银杏酸含量的影响。根据中国药典质量标准,以提取物中黄酮为含量优化成分,银杏酸为含量控制成分,内酯为含量保证成分,尽可能使黄酮提取率最大,优化了银杏提取物的生产工艺条件。参照中国、美国和欧洲药典,建立并考察了银杏叶中黄酮及银杏酸含量的HPLC-DAD分析方法,以及银杏叶提取物中内酯含量的以HPLC-ELSD测定方法。采用所建立的方法对银杏叶及本文制备的各批次银杏叶提取物的质量进行了分析。  研究发现银杏叶提取物中黄酮含量与洗脱液的乙醇浓度及体积正相关;提取物得率与洗脱液体积负相关、其与乙醇浓度的关系随银杏叶中黄酮含量而变化;低黄酮含量银杏叶的提取物质量对工艺参数最为敏感;提取物中内酯含量与银杏叶中黄酮含量呈正相关关系并与提取物中黄酮含量、洗脱液体积呈负相关关系。为保证提取物质量、工艺条件和得率的稳定,建议通过不同质量原料混合的方式使银杏叶中黄酮含量维持在1%,使用7倍量和4倍量55%乙醇分别提取4小时和2小时;经过水沉及大孔树脂吸附后,采用2倍量15%乙醇洗脱纯化、55%乙醇解吸,以DM130作为吸附树脂、AB-8作为除酸树脂,可得到25.7%的黄酮醇苷含量,内酯含量>6%,银杏酸含量<10μg/g,黄酮提取率66.8%的银杏叶提取物。对0.6%-0.8%黄酮含量的银杏叶原料,通过优化纯化工艺,亦可在较高黄酮提取率(46.1~50.6%)下,获得黄酮、内酯及银杏酸的含量符合标准的银杏提取物。  论文进一步对整个银杏叶提取过程进行了各步骤的物料衡算,为实际生产提供了基础数据。
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