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试验一：烟曲霉毒素B1对鸡肝脏细胞的毒性作用 本试验旨在研究FB1对鸡肝脏细胞的毒性作用。将体外培养的鸡肝脏细胞分为6组，每组6个重复，1组为对照组，2-6组为 FB1组，分别在培养基质中添加 FB1，使 FB1终浓度为2.5、5、10、20和40μg/mL。染毒培养48 h，检测肝脏细胞存活率以及培养基质、肝细胞相关生化指标。结果表明，添加FB12.5-40μg/mL组肝脏细胞存活率显著低于对照组（P<0.05）。添加FB110-40μg/mL组基质中总抗氧化能力、POD活性显著低于对照组（P<0.05）。添加 FB12.5-40μg/mL组基质中 LDH活性显著高于对照组（P<0.05）。添加FB120μg/mL组基质中总胆固醇含量显著低于对照组（P<0.05）。添加FB120μg/mL组细胞中总蛋白含量显著低于添加FB12.5μg/mL组（P<0.05）。添加FB15-40μg/mL组MDA含量和ALT活性显著高于对照组（P<0.05）。添加FB15-40μg/mL组SOD活性显著低于对照组（P<0.05）。添加FB140μg/mL组AST活性显著高于其余各组（P<0.05）。由此可以看出，FB1具有明显的肝细胞毒性，氧化损伤是FB1致肝细胞毒性的重要致病机制。 试验二：烟曲霉毒素B1对鸡脾脏淋巴细胞免疫毒性以及凋亡机理研究 本试验旨在研究烟曲霉毒素 B1对鸡脾脏淋巴细胞免疫毒性以及凋亡机理。将体外培养的鸡脾脏淋巴细胞细胞分为6组，每组6个重复，1组为对照组，2-6组为FB1组，分别在培养基质中添加FB1，使FB1终浓度为2.5、5、10、20和40μg/mL。检测脾脏淋巴细胞转化率、培养基质中细胞因子含量以及 LDH活性，透射电镜和流式细胞仪检测细胞凋亡，检测脾脏淋巴细胞凋亡调控基因mRNA相对表达量及蛋白含量。结果表明，2.5-40μg/mL FB1组脾脏淋巴细胞转化率显著低于对照组（P<0.05）；2.5-40μg/mL FB1组IL-2、IL-4、IL-6、INF-γ含量显著低于对照组，20、40μg/mL FB1组显著低于5μg/mL FB1组（P<0.05）；5-40μg/mL FB1组 IL-12含量显著低于对照组和2.5μg/mL FB1组（P<0.05），40μg/mL FB1组显著低于5、10μg/mL FB1组（P<0.05）；2.5-40μg/mL FB1组LDH活性显著高于对照组（P<0.05），40μg/mL FB1组显著高于其它各组（P<0.05）。电镜及流式检测鸡脾脏淋巴细胞出现明显的凋亡。40μg/mL FB1组Bcl-2 mRNA相对表达量以及蛋白含量显著低于对照组（P<0.05）；5、10、40μg/mL FB1组p53 mRNA相对表达量以及蛋白含量显著高于对照组（P<0.05）；5-40μg/mL FB1组Bax mRNA相对表达量以及蛋白含量显著高于对照组（P<0.05）。40μg/mL FB1组Bak-1、Caspase-3 mRNA相对表达量以及蛋白显著高于对照组（P<0.05）。FB1可以抑制鸡脾脏淋巴细胞的增殖，降低细胞因子水平，诱导细胞凋亡，通过Bax、Bak-1、Caspase-3通路导致细胞凋亡，由此产生细胞和免疫毒性。 试验三：烟曲霉毒素B1、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮联合对蛋雏鸡的影响 本试验探讨烟曲霉毒素 B1、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮在限量标准下联合致 SPF蛋雏鸡毒性作用。选取15只 SPF蛋鸡，随机分为3组，每组5只鸡，第1组为对照组，第2组为DON+ZEN组，第3组为FB1+DON+ZEN组。试验至21 d，观察蛋雏鸡的生长状况，检测脏器指数，血液生化指标以及免疫指标的变化情况，检测脾脏、肺脏、肝脏组织学变化。FB1+DON+ZEN组平均日增重、脾脏指数和睾丸指数显著低于对照组（P<0.05）。FB1+DON+ZEN组肝脏指数、肾脏指数显著低于 DON+ZEN组和对照组（P<0.05）。FB1+DON+ZEN组和DON+ZEN组心脏指数、肺脏指数显著低于对照组（P<0.05）。FB1+DON+ZEN组谷胱甘肽过氧化物酶活性、总抗氧化能力显著低于对照组（P<0.05）。FB1+DON+ZEN组谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性显著高于对照组（P<0.05）。FB1+DON+ZEN组IgA和IL-2含量显著低于对照组和DON+ZEN组（P<0.05）。DON+ZEN组IgG和IFN-γ含量显著低于FB1+DON+ZEN组和对照组（P<0.05）。FB1+DON+ZEN组IgM、NDV-Ab含量显著高于DON+ZEN组和对照组（P<0.05）。限量标准下DON和FB1对ZEN的生殖毒性具有明显的增效效应，三种毒素对蛋雏鸡氧化损伤具有明显的加性或亚加性效应，三种毒素联合作用对蛋雏鸡具有免疫毒性。