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目的：人类胎盘的形成始于胚胎植入，涉及滋养层细胞对子宫上皮和基质的侵润，是母胎组织相互作用的结果，包括一系列复杂的滋养层细胞增生、侵润、迁移和分化的过程。Fbxw8是泛素E3连接酶复合体中负责识别待降解底物的F-box蛋白，基因敲除Fbxw8，小鼠表现为胎盘发育缺陷及胚胎发育迟缓。此外，靶向抑制Fbxw8表达，通过抑制cyclin D的降解，诱导细胞阻滞于G1/S期，调控结肠癌细胞的增殖。但是，Fbxw8对滋养层细胞的增殖、侵润和迁移功能的影响及其机制尚未见报道。
方法：应用免疫组化和免疫印迹检测Fbxw8蛋白在恒河猴及人妊娠早期胎盘绒毛的表达：通过半定量RT-PCR、免疫荧光检测Fbxw8在不同滋养层细胞中的表达及定位情况。Fbxw8 siRNA转染HTR-8/SVneo和B6Tert细胞，研究靶向抑制Fbxw8对细胞侵润和迁移能力的影响，即通过半定量RT-PCR和免疫印迹检测Fbxw8表达、Matrigel细胞侵润实验、Transwell迁移模型检测细胞侵润和迁移能力及明胶酶谱法检测MMP-2，9的活性。在绒癌JEG-3细胞（妊娠早期滋养层细胞模型），利用靶向抑制及过表达Fbxw8，研究它对细胞增殖能力的影响，即通过CCK-8法测定细胞增殖活力、流式细胞仪测定细胞周期、real-time PCR及Western blotting检测Fbxw8对细胞周期蛋白cyclin A、cyclin B1、CDK1、CDK2及p27 mRNA及蛋白水平的表达，最后检测抗增殖基因BTG2 mRNA的表达情况。
结果：研究结果显示，Fbxw8在人及恒河猴早期妊娠胎盘绒毛呈现高表达，在人绒癌细胞系JEG-3细胞及JAR细胞高表达（它们是被广泛应用的妊娠早期滋养层细胞模型）；在HTR8/SVneo细胞（转化的侵润型人绒毛外滋养层细胞系）和B6Tert细胞（转染了端粒酶的永生化滋养细胞系）也有较强表达，且主要表达在胞浆。Fbxw8 siRNA显著下调HTR8/SVneo、B6Tert及JEG-3细胞中Fbxw8 mRNA水平和蛋白水平的表达(P<0.01)，并且对HTR8/SVneo和B6Tert细胞侵润和迁移能力有显著的抑制作用(P<0.01)，同时还能显著降低HTR8/SVneo细胞MMP-9活性(P<0.05)及B6Tert细胞MMP-2和MMP-9活性（P<0.01)。Fbxw8 siRNA显著抑制绒癌细胞JEG-3细胞增殖活力（P<0.05）；导致细胞周期分布改变，G2/M期细胞数量增加，由9.2％(control siRNA)增加到20.65％(Fbxw8 siRNA 1)和18.65％(Fbxw8 siRNA 2);并且周期蛋白依赖性激酶抑制剂p27的表达增加，G2/M细胞周期调控蛋白CDK1、CDK2、cyclinA及cyclin B1的表达减少；同时，抗增殖基因BTG2 mRNA表达升高；Fbxw8过表达JEG-3细胞G2/M期细胞数量减少由14.68％(Mock)降低到4.99％(Fbxw8)，而S期细胞显著增加，由47.94％(Mock)升高到59.85％(Fbxw8)。另外，Fbxw8过表达JEG-3细胞p27及G2/M细胞周期调控蛋白及BTG2 mRNA表达与Fbxw8 siRNA转染细胞相反。
结论：研究结果表明，Fbxw8在妊娠早期胎盘绒毛组织及来源于早期胎盘绒毛的滋养层细胞中广泛表达，提示Fbxw8可能在人类妊娠早期发挥重要作用。靶向抑制Fbxw8表达可通过降低MMP-2和MMP-9的活性，从而抑制滋养层细胞侵润和迁移能力。Fbxw8影响JEG-3细胞增殖与周期蛋白依赖激酶抑制剂p27的表达呈负相关，与G2/M细胞周期调控蛋白CDK1、CDK2、cyclin A及cyclin B1的表达与呈正相关；进一步研究表明，这种作用可能是通过调控抗增殖基因BTG2的表达实现的。