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本实验通过调查黑龙江省哈尔滨市医科大学附属第二临床医院肺炎克雷伯菌产生超广谱β-内酰胺酶情况，构建重组原核表达质粒pUC19-SHV，分析ESBL编码基因不同序列及耐药特点，使临床医师及实验室检测人员充分认识和掌握耐药性细菌的临床意义和理论依据，为合理使用抗生素 研究采用SHV、TEM型ESBL特异性引物PCR扩增获得SHV和TEM型ESBL的编码基因，确定临床分离株产ESBL的优势型别；构建重组质粒pUC19-SHV，经酶切、琼脂糖凝胶电泳验证其正确性，通过测定序列确定其亚型并进行原核表达和其耐药性检测。
结论为，自黑龙江省哈尔滨医科大学附属第二临床医院收集的肺炎克雷伯菌100％对青霉素耐药，且对多种三代头孢菌素类抗生素耐药。产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌阳性率较高，提示有流行的可能。产ESBL菌肺炎克雷伯菌见于临床各科室，主要分布于ICU病房。肺炎克雷伯菌产酶株以产生SHY型ESBL多见。构建重组质粒测序后证实本地区产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌为SHY-12的编码基因，该基因介导对头孢哌酮等多种抗生素耐药。大肠埃希菌原核表达系统可用于ESBL的研究。