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目的:研究长春瑞滨(NVB,Navelbine)对人肺腺癌Anip973细胞的凋亡、端粒酶活性及hTERT—mRNA表达的影响。
方法:用不同浓度的长春瑞滨作用Anip973细胞,于不同时间收集细胞,MTT法观察长春瑞滨对Anip973细胞的生长抑制作用;流式细胞术观察Anip973细胞凋亡率:倒置显微镜和电镜观察细胞形态学变化;应用以PCR为基础的端粒重复序列扩增(TRAP—PCR)银染法检测端粒酶活性;逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测端粒逆转录酶hTERT—mRNA表达。
结果:不同浓度的长春瑞滨均可诱导Anip973细胞凋亡,且可降低Anip973细胞中端粒酶活性和hTERT—mRNA的表达,并呈时间.剂量依赖性,用药组与对照组比较差异有显著性(P<0.01):hTERT—mRNA表达的改变比端粒酶活性更敏感;细胞凋亡率的增加与细胞hTERT—mRNA表达呈负相关(R=-0.96046,P<0.01)。
结论:长春瑞滨的作用机制与端粒酶有关,诱导凋亡是其发挥抗癌作用的机制之一。检测端粒酶活性和hTERT—mRNA表达有助于判定NVB诱导肺癌细胞凋亡的敏感性。