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壳聚糖及其衍生物的硫酸酯是一种类肝素物质,它是壳聚糖及其衍生物硫酸酯化后的产物。由于壳聚糖及其衍生物的硫酸酯具有一些优异的性质,例如:抗病毒性、抗肿瘤活性、抗凝血活性以及较好的生物相容性,他们在海洋药物以及生物功能材料领域有着广泛的应用。本文主要研究内容如下:
1.将壳聚糖分别羧甲基化及羧丁酰化制备了羧甲基壳聚糖及羧丁酰壳聚糖,将壳聚糖采用双氧水降解制备了水溶性低分子量壳聚糖。在均相条件下,采用水溶性酯化剂三磺酸钠胺N(SO3Na)3对壳聚糖及其衍生物进行硫酸酯化,制得了羧甲基壳聚糖硫酸酯(CMCS),羧丁酰壳聚糖硫酸酯(NSCS)和水溶性壳聚糖硫酸酯(WSCS)。红外光谱及核磁共振谱图证实了羧甲基基团,羧丁酰基团以及硫酸酯基团的引入。
2.壳聚糖及其衍生物的硫酸酯中硫酸酯基团的含量与反应体系的pH值,反应物的投料比例,反应温度和反应时间有着密切的关系。采用单因素实验法对制备壳聚糖及其衍生物硫酸酯的操作条件进行了优化,得到了制备各种硫酸酯的最佳反应条件。在最佳反应条件下制得的CMCS中硫酸酯基团含量为26.26%,NSCS中硫酸酯基团含量为41.93%,WSCS中硫酸酯基团含量为61.41%。
3.考察了不同硫酸酯基团含量,不同分子量及不同浓度的壳聚糖及其衍生物的硫酸酯对活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶原时间(PT)和凝血酶时间(TT)的影响,实验结果表明,APPT、PT及TT随着硫酸酯基团含量及浓度的增加而增加,对APTT的增强最为明显,同时随着分子量的变化而变化。壳聚糖及其衍生物的硫酸酯的APPT、PT及TT值均高于正常值,这说明制备的壳聚糖及其衍生物的硫酸酯是较好的抗凝剂。
4.采用不同硫酸酯基团含量的壳聚糖及其衍生物的硫酸酯对大鼠胚胎皮肤成纤维细胞进行培养,采用MTT法研究了其对成纤维细胞生长的作用。实验结果表明,壳聚糖及其衍生物硫酸酯在100μg/ml浓度时对成纤维细胞生长具有较好的促进效果,硫酸酯基团含量较高的硫酸酯产物对细胞生长的促进效果更为明显。