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热应激蛋白70(HSP70)作为最重要的分子伴侣参与到动物机体内的热应激反应之中,为了研究HSP70-A8基因对奶牛生产性能和耐热性能的影响,以397头荷斯坦奶牛为主要研究对象,采用单链构象多态性(PCR-SSCP)技术,对HSP70-A8基因编码区(664 to 5089)进行克隆与多态性研究,并分析其与奶牛DHI生产性能的相关性；以10头荷斯坦牛和娟×荷杂交牛为研究对象,采用实时荧光定量技术(RT-PCR)分析和比较了不同遗传型奶牛在不同季节(环境温度)下HSP70-A8基因在血液组织中的相对表达水平,同时分析了表达水平与生理指标的关系。取得的结果如下：1.荷斯坦奶牛HSP70-A8基因的多态性及其遗传分析利用PCR-SSCP方法进行检测,在HSP70-A8基因的第2-8外显子上均没有检测到突变,在第1外显子1522BP处存在G→C的错义突变,使编码的氨基酸由谷氨酰胺变成组氨酸。检测到有三种基因型AA、AB和BB。其中AA基因型频率为38.56%,AB基因型频率分别为31.03%,BB基因型频率分别为30.41%；多态信息含量(PIC)为0.3733,在该位点均处于中度多态；卡方检验表明试验牛群体处于哈迪-温伯格不平衡状态。2.荷斯坦奶牛HSP70-A8基因的多态性与生产性能的关联分析对该位点的不同基因型与生产性能进行关联分析,结果表明：AA型和AB型个体的305d标准乳产量、总经济校正奶量、305d乳脂产量、305d乳蛋白产量和总乳蛋白产量极显著低于BB型个体(P<0.01)；AA型个体的标准乳总产量、总产奶量、305d经济校正奶量和总乳脂产量显著低于AB型个体(P<0.05),AB型又极显著低于BB型个体(JP<0.01);AA型个体的体细胞数极显著低于AB型个体和BB型个体(P<0.01)。3.不同遗传型奶牛在不同环境温度下HSP70-A8基因表达水平的比较分析采用实时荧光定量PCR方法分析HSP70-A8基因在不同季节中的相对表达量,结果表明：夏季HSP70-A8基因在荷斯坦牛和F1代中的表达量极显著低于在F2代中的表达量(P<0.01),秋季和冬季HSP70-A8基因在三个品种中的表达差异不显著；荷斯坦奶牛HSP70-A8基因在三个季节中的表达量差异不显著,F1代HSP70-A8基因在三个季节的表达量差异不显著,F2代HSP70-A8基因在夏季的表达量显著高于冬季(P<0.01)。4.奶牛主要生理指标差异性分析及其与HSP70-A8基因表达水平关联分析对HSP70-A8基因表达量和生理指标进行分析,结果表明：奶牛在夏季的呼吸频率显著高于秋冬季节(P<0.01),夏季的直肠温度明显高于冬季(P<0.01),奶牛在三个季节中的心跳次数差异不显著。在三个季节中,不同品种之间的呼吸频率、直肠温度和心跳次数差异均不显著。HSP70-A8的表达量和奶牛的呼吸频率、心跳次数和直肠温度均无明显相关性。研究结果提示HSP70-A8基因对于奶牛的生产性能具有显著性影响,可以作为奶牛生产性能选择的候选遗传分子标记,BB基因型个体可以作为生产性状优势个体进行培育。