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本文研究猪胰高血糖素样肽2(Porcine glucagon-like peptide-2,pGLP-2),聚乙二醇修饰猪胰高血糖素样肽2(PEGylatedpGLP-2,PEG-pGLP-2)和pGLP-2微球在大鼠体内的药代动力学特征,根据其结果,研究PEG-pGLP-2剂量和给药频率对DSS诱导结肠炎大鼠的肠道修复效果,为pGLP-2长效化物在肠道损伤修复中的应用提供参考依据。pGLP-2及其长效化物在大鼠体内的药代动力学研究:选取18只280 g左右的雄性SD大鼠,随机分为3组,分别单次皮下注射pGLP-2(5.64 nmol/kg),PEG-pGLP-2(5.64nmol/kg)和pGLP-2微球(15mg/只),定点采血后,ELISA法测定GLP-2血药浓度。结果表明:PEG-pGLP-2的半衰期(t1/2)是pGLP-2的4倍,平均滞留时间(MRT)是pGLP-2的3倍,药时曲线下面积(AUC0-t)则是pGLP-2的3倍,清除率(CL)是pGLP-2的一半,两者的达峰浓度(Cmax)相差不大,PEG-pGLP-2的达峰时间(Tmax)滞后于 pGLP-2。pGLP-2 微球的 t1/2 为 72.2±6.02 h,MRT 为 90.66±7.41 h。不同剂量PEG-pGLP-2对大鼠肠道损伤的修复研究:35只雄性健康SD大鼠按体重随机分配到饮水组、葡聚糖硫酸钠组(DSS组)、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组7只。各组处理如下:饮水组(饮蒸馏水)和DSS组(饮5%的DSS溶液)均皮下注射300μL生理盐水,低、中、高剂量组饮5%的DSS溶液,分别皮下注射22 μg/只、44μg/只、176 μg/只的PEG-pGLP-2溶液。第8天称重后屠宰大鼠,测量小肠及结肠长度和重量;取血液、十二指肠、结肠待测。结果表明:DSS组大鼠较饮水组大鼠体增重、结肠长度、绒毛高度显著降低(P<0.05);较DSS组,低剂量组体增重、结肠长度及结肠重量均显著增加(P<0.05),中剂量组体增重和结肠重量显著增加(P<0.05),高剂量组体增重显著增加(P<0.05)。较DSS组,低剂量组、中剂量组及高剂量组的绒毛高度显著增加(P<0.05),中剂量组绒毛高度隐窝深度比值显著提高(P<0.05)。DSS显著增加大鼠炎症,DSS组大鼠较饮水组大鼠结肠炎性评分和结肠IL-1、IL-7、IL-10、TNF-α及IFN-γ mRNA的表达显著提高(P<0.05)。较DSS组,低、中、高剂量组均能显著降低结肠的炎性评分和结肠IL-1、IL-7及TNF-α mRNA的表达(P<0.05),低剂量组能显著降低IL-10的表达,中剂量组显著降低IL-10和IFN-y的表达(P<0.05)。DSS会破坏大鼠的肠道完整,DSS组大鼠较饮水组大鼠显著地降低了结肠中Z0-1的表达,并引起Claudin-1的代偿性增加(P<0.05)。相较DSS组,高剂量组能显著提高ZO-1的表达,中剂量组和高剂量组能显著提高Occlduin的表达并降低Claudin-1的代偿性增加(P<0.05)。PEG-pGLP-2给药频率对DSS诱导结肠炎大鼠损伤修复的研究:35只雄性健康SD大鼠按体重随机分配到饮水组、葡聚糖硫酸钠组(DSS组)、1D组、2D组、3D组,每组7只。各组处理如下:饮水组(饮蒸馏水)和DSS组(饮5%的DSS溶液)均皮下注射300 μL生理盐水,1D组、2D组、3D组饮5%的DSS溶液,分别皮下注射44μg/d/只、88μg/2d/只、132μg/3d/只的PEG-pGLP-2溶液。第8天称重后屠宰大鼠,测量小肠及结肠长度和重量;取血液、十二指肠、结肠待测。结果表明:DSS组大鼠较饮水组大鼠体增重、结肠长度、结肠重量、绒毛高度显著降低(P<0.05)。较DSS组,1D组体增重、结肠重量、绒毛高度和绒毛高度隐窝深度比值都显著增加,2D组体增重、结肠长度和绒毛高度都显著增加,3D组体增重和绒毛高度隐窝深度比值显著增加(P<0.05)。DSS显著增加大鼠炎症,DSS组大鼠较饮水组大鼠结肠炎性评分和结肠IL-1、IL-10和IFN-γ mRNA的表达显著提高(P<0.05)。较DSS组,1D组、2D组、3D组均能显著降低结肠的炎性评分(P<0.05),此外,1D组显著降低IL-1、IL-7、IL-10及IFN-γ的表达(P<0.05),2D组显著降低IL-1、IL-6、IL-7、IL-10及IFN-y的表达(P<0.05),3D 组显著降低 IL-1、IL-6、IL-7、及 IFN-y的表达(P<0.05)。DSS会破坏大鼠的肠道完整,DSS组大鼠较饮水组大鼠显著地降低了结肠中ZO-1的表达,并引起Claudin-1的代偿性增加(P<0.05)。相较DSS组,1D组能显著提高ZO-1及Occlduin的表达,并降低Claudin-1的代偿性增加(P<0.05),2D组和3D组显著提高Occlduin的表达,降低Claudin-1的表达(P<0.05)。综上所述,经PEG修饰后PGLP-2的半衰期延长,达峰时间滞后,平均滞留时间延长,血浆清除减慢,生物利用度更高;pGLP-2微球半衰期更长,且持续稳定的释放。PEG-pGLP-2能有效修复大鼠结肠炎肠道损伤,抑制体重降低,提高肠道上皮的完整性,降低炎性因子的表达,中剂量组(44μg/只)的修复效果最佳。同等剂量的PEG-pGLP-2不同的给药频率(1d/次,2d/次,3d/次)对DSS诱导的大鼠结肠炎损伤均有修复效果。综合考虑疗效及操作便利等因素,建议对DSS诱导产生的大鼠结肠炎采用88 μg/2d/只的修复方案