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本研究以多层纸芯片为技术平台，构建了乳腺癌组织微阵列并将之用于抗肿瘤药物反应测试。研究内容包括： 一、多层纸芯片上的乳腺癌组织微阵列构建 目的：发展一种基于多层纸芯片的乳腺癌组织微阵列构建方法。 方法：以喷蜡打印滤纸方法加工图形化亲水点阵，滤纸折叠后构成多层纸芯片。多层纸芯片顶层打孔并覆以微孔薄膜，用以仿真血管内皮层。将乳腺癌MDA-MB-231细胞分别接种于纸芯片各层亲水区，折叠后浸入培养基中培养。在培养的7天内，拆解多层纸芯片检测不同时间乳腺癌组织内各层面的细胞形态、存活率、细胞周期分布以及细胞内乳酸含量。 结果：培养7天内，接种在纸芯片上的乳腺癌细胞增殖并形成类组织结构，各层细胞存活率均保持在80％以上。芯片乳腺癌组织内部呈酸化倾向，且酸化程度随着培养时间的延长而升高。与2D培养细胞相比较，纸芯片乳腺癌组织内细胞增殖比例显著降低（60% vs15%）。 结论：所发展的纸芯片乳腺癌组织微阵列构建方法操作简便、仿真度高，有望成为肿瘤研究的有力工具。 二、多层纸芯片乳腺癌组织微阵列用于抗肿瘤药物反应测试 目的：发展一种基于多层纸芯片乳腺癌组织微阵列的抗肿瘤药物反应测试方法。 方法：乳腺癌MDA-MB-231细胞接种在纸芯片上培养后第二天，更换含有不同浓度盐酸阿霉素的新鲜培养基。培养24h后取出滤纸，Calcein-AM/ PI染色，荧光显微镜观察拍照，并利用 Photoshop软件计算每层细胞存活率。同时，以96孔板培养细胞做2D组对照实验。 结果：多层纸芯片乳腺癌组织显示了更加接近体内情况的药物反应机制，细胞存活率随着阿霉素浓度升高呈现缓慢下降趋势，IC50值显著高于2D培养细胞组（5.0μmol/L vs1.144μmol/L）。 结论：纸芯片平台有效、细致地仿真了体内乳腺癌微环境。与传统方法相比较，纸芯片药物测试更为简便，仿真度高，测试结果也更加接近体内实际情况。这种基于纸芯片的抗肿瘤药物反应测试方法有望为肿瘤个体化治疗方案的制定提供重要的参考信息。