【摘 要】
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目的: 研究石氏伤科验方柴胡细辛汤加减改善颅脑损伤后认知功能的作用及其机制。 方法: 1.将97只清洁级雄性SD大鼠随机分为六组:模型组(CCI group+DDW，CM)、阳性对照
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目的: 研究石氏伤科验方柴胡细辛汤加减改善颅脑损伤后认知功能的作用及其机制。 方法: 1.将97只清洁级雄性SD大鼠随机分为六组:模型组(CCI group+DDW，CM)、阳性对照药盐酸多奈哌齐（安理申）片组(CCI+DHT group，DHT)，中药低剂量组(CCI+Low-BADs group，LBAD)、中药高剂量组(CCI+High-BADs group，HBAD)、假手术组(Sham-operated group+DDW SO)和正常对照组(normal control group，NC)，分别予以控制性脑皮质撞击造模(CCI)或假手术，造模后予伤情评估，造模次日灌胃给药，给药4周后，检测认知功能(Mirrors水迷宫)、神经功能缺损评分(mNSS)、血清乙酰胆碱转移酶(CHAT)、脑组织病理与海马CA1区超微结构。2.将6只清洁级雄性SD大鼠随机分组，不造模，仅灌胃制作低剂量中药(LBAD)、阳性对照药(DHT)含药血清，与正常血清对照，运用鼠HT22海马神经元制作海马神经元谷氨酸损伤模型，进行含药血清培养，予倒置显微镜下观察形态，CCK法检测神经元增殖活性、Western blot法检测β-Ⅲ Tubulin、MAP2蛋白表达。 结果: (1)成功制作CCI颅脑损伤大鼠模型，其伤情从造模后苏醒时程、mNSS评分及神经体征等表现，属于中度颅脑损伤。 (2)认知功能水迷宫测试中，与模型组相比，三个药物治疗组逃避潜伏期时间都有所降低，但阳性药物组、中药低剂量组明显(分别为P＜0.01、P＜0.05)。与模型组相比，两个中药治疗组mNSS评分明显降低(P＜0.01、P＜0.05)。血清乙酰胆碱转移酶方面，模型组含量降低;三个药物治疗组均略高于模型组而接近假手术组，但各组之间比较无统计学差别(都为P＞0.05)。 (3)常规HE病理，三个药物治疗组损伤海马区形态学显示好于模型组;免疫组化中BDNF检测，与假手术组相比，中药低剂量组、高剂量组的免疫阳性产物光密度都有升高（都是P＜0.01）;与模型组相比，中药高剂量组作用确切，并且，中药高剂量组优于中药低剂量组(都为P＜0.01)。SYN1检测，中药高剂量组的免疫阳性产物光密度都明显高于假手术组、模型组、阳性药组和中药低剂量组(都为P＜0.01)。电镜结果显示实验中药能够改善海马CA1区受损的神经元、线粒体和突触的超微结构。 (4)体外培养方面，CCK-8法检测显示低剂量中药含药血清能够促进谷氨酸损伤海马神经元的增殖与活力(都是P＜0.05);Western blot显示，低剂量中药含药血清能够促进MAP2、β-Ⅲ Tubulin两种蛋白的表达(都是P＜0.05)。 结论: 石氏伤科验方柴胡细辛汤加减能够改善中度颅脑损伤模型大鼠认知功能及其神经功能缺损评分，其机制为:提高BDNF、SYN1的表达以促进损伤的海马CA1区神经元的修复与突触的重塑，改善海马CA1区超微结构;与血清乙酰胆碱转移酶可能有一定的关联性。体外培养可通过促进MAP2、β-Ⅲ Tubulin两种蛋白的表达、增强谷氨酸损伤后海马神经元的增殖与活力，来防治谷氨酸诱导的HT22鼠海马神经元损伤。
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