核素富集生物质的微生物后处理关键技术研究

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核能的开发和利用给人类带来了巨大的作用,铀矿的开采和冶炼所排放的含铀废水对土壤造成了严重污染。目前关于铀污染的修复方法选用最多的是植物修复,此方法具有绿色环保、成本较少、修复效果好的特点,但关于核素富集生物质的微生物后处理技术的研究十分少见。本论文针对这一问题从自然环境中筛选出一株优势菌株,对其进行紫外诱变来获取诱变菌株;通过对诱变菌进行培养条件的优化来确定最优诱变菌株;研究优势菌株对铀的耐受性的去除效果及包埋菌株对废水中铀的去除效应,使其能为核素富集生物质的后处理提供一定的理论和技术支持。主要研究结果如下:(1)通过从水稻田、树林里、牛粪里进行采样,经刚果红选择性培养基筛选出能够降解纤维素、产生纤维素酶的菌株,选取透明圈和菌落比值大且长势好的菌株并进行菌种鉴定,对此菌株进行紫外诱变,最后获得一株高产纤维素酶的菌株JJ-1。结果表明,筛选出产纤维素酶的菌株共8株,其中细菌JJ的透明圈直径最大,培养3天后可达15 mm,菌落直径为6 mm。经Biolog鉴定为枯草芽孢杆菌亚种(Bacillus subtilis subsp)。再将菌株JJ经过紫外线物理诱变,诱变后的菌株JJ-1菌落直径为11 mm,透明圈直径为28 mm,比未诱变前显著提高。CMCA酶活测定结果比诱变前提高近一倍,达0.1U/m L。传代4代后产酶遗传稳定性好,说明细菌JJ-1具有较好的产纤维素酶能力。(2)通过p H值,时间,温度,接种量等四个因素对菌株JJ-1进行优化培养,运用正交试验结果分析确定菌株JJ-1在p H为7.0、35℃(温度)时间为20 h的培养条件下按5%接种量通过BPG培养基培养得到的OD600值最高,为2.280,通过LB培养基培养得到的OD600值为0.191。此结果说明菌株JJ-1在优化条件下经BPG培养基培养的效果是LB培养基培养效果的10倍。(3)通过去除铀的微生物初筛,筛选出耐受性较强的枯草芽孢杆菌。经试验研究表明,相同浓度下铀对枯草芽孢杆菌的毒害作用小;48h时,枯草芽孢杆菌去除铀的效率达到90.7%。(4)采用枯草芽孢杆菌/海藻酸钠壳聚糖微胶囊对铀污染废水进行了生物吸附研究,并以游离枯草芽孢杆菌为对照,评价了其对水溶液中铀离子的吸附能力。结果表明,枯草芽孢杆菌/海藻酸钠壳聚糖微胶囊在20℃时吸附铀的最大值为300 mg/g,50℃时开始减小。初始p H为6时枯草杆菌/海藻酸钠-壳聚糖微胶囊和海藻酸钠-壳聚糖微胶囊对铀的去除率达到最大。在初始铀浓度为150 mg/L时吸附量达到了376.64 mg/g。综上,经试验研究筛选出的产纤维素酶较好的菌株JJ,在一定程度上能够给工农业的资源利用和后续关于微生物降解重金属富集生物质的研究提供帮助。
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