丰产鲫败血症病原菌豚鼠气单胞菌CSS-4-2的快速检测和免疫效果研究

• 作 者: 谢凤
• 机 构: 华南师范大学
• 出 处: 华南师范大学
• 发表日期: 2002年期
• 关键词: CSS-4-2菌株 细菌性败血症 免疫检测 Dot-ELISA 荧光抗体 染色技术 玻片凝集试验 免疫防治

丰产鲫败血症病原菌豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)CSS-4-2灭活菌株免疫纯种新西兰白兔后，制备免疫血清的凝集效价为640。应用Dot-ELISA法、间接荧光抗体染色法和玻片凝集法对CSS-4-2菌株的全菌抗原进行检测，最低检出水平分别为10cells／ml、10~5 cells／ml、10~8 cells／ml。通过对22尾人工感染CSS-4-2菌株死亡或有明显症状丰产鲫的肝、脾、肾组织进行检测，Dot-ELISA法检测匀浆上清液的阳性检出率为97％；玻片凝集法检测分离菌的阳性检出率为100％。而对12尾人工感染CSS-4-2菌株未显症状丰产鲫的肝、脾、肾组织进行检测，Dot-ELISA法检测匀浆上清液的阳性检出率为25％；玻片凝集法检测分离菌的阳性检出率为80.5％。荧光抗体染色法测出呈现荧光数目与CSS4-2菌悬液浓度存在一定的相关性，菌悬液浓度大的，呈现荧光数目越多；反之则少。总之，三种免疫检测方法不仅可检测死亡或症状明显的丰产鲫，而且还可检测症状不明显的丰产鲫或病菌携带者。 应用Dot-ELISA法研究不同来源的水体和其他常见鱼类致病菌对CSS-4-2菌株检测的影响，发现pH7.4PBS缓冲液可提高Dot-ELISA法的最低检出水平；嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)会发生影响检测结果的交叉反应；荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)对检测结果无影响。菌体攻毒丰产鲫和草鱼试验表明CSS-4-2菌株对丰产鲫和草鱼都有致病性，但死亡或发病草鱼表现的症状不如丰产鲫明显，其发病机理可能存在一定的差异。超滤菌液攻毒试验表明CSS-4-2菌株滤液不引起丰产鲫和草鱼发病或死亡，致病因子可能不是外毒素。在水温25-32℃时，加热灭活全菌疫苗腹腔注射免疫丰产鲫，免疫后 10 d，血清凝集效价最高为 88；但免疫保护率在免疫后 30 d达到最高，CSS4－2疫苗H左剂组为 11O，CSS4－2疫苗组为80％。以后逐渐下降，免疫后40 d，其血清凝集效价0：C％＊－2疫苗H左剂组免疫保护率为20O／，CSS－4－2疫苗组为10％。加热灭活全菌疫苗在4C下保存gd，其免疫保护率仅为30％。