【摘 要】
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人类基因组DNA序列中微小的变异,会导致多种疾病,例如癌症、哮喘、糖尿病等.疾病的基因诊断主要是DNA变异的诊断,它对疾病的早期诊断、治疗和预后都具有重要意义.目前,尚无一
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人类基因组DNA序列中微小的变异,会导致多种疾病,例如癌症、哮喘、糖尿病等.疾病的基因诊断主要是DNA变异的诊断,它对疾病的早期诊断、治疗和预后都具有重要意义.目前,尚无一种成熟的DNA变异检查方法可以推广为临床常规诊断项目,这主要是因为传统DNA变异检查方法的局限性.我们利用毛细管电泳——激光诱导荧光检测系统(CE-LIF)和分子信标杂交理论,尝试建立一种新的PCR产物分析方法,以应用于野生型癌症相关基因的临床筛查.该研究用PCR扩增30例胃癌组织DNA的p73基因第3外显子、p53基因第5外显子和p16基因第2外显子,所得PCR产物与分子信标杂交,利用CE-LIF检测杂交产物,检出野生型基因.以SSCP为对照方法.CE-LIF分子信标法与SSCP比较,测得p73基因第3外显子野生型百分率分别为100％和100％;测得p53基因第5外显子野生型百分率分别为60.0％和63.3％(p=0.99),突变与缺失百分率分别为40.0％和36.7％;测得p16基因第2外显子野生型百分率分别为20.0％和20.0％.利用分子信标与CE-LIF联合检测野生型基因,是一种良好的筛选方法,快速、简便、成本低,适宜发展为临床常规筛查项目.
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