【摘 要】
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本研究通过设计猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)特异性引物,采用PCR方法对长春地区某猪场的疑似PMWS致死猪进行检测,结果为PCV2阳性。进一步将肺、脾脏、淋巴结等组织病料用PK-15细胞进
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本研究通过设计猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)特异性引物,采用PCR方法对长春地区某猪场的疑似PMWS致死猪进行检测,结果为PCV2阳性。进一步将肺、脾脏、淋巴结等组织病料用PK-15细胞进行病毒分离,并用透射电镜和间接免疫荧光实验鉴定分离的毒株,证明为猪Ⅱ型圆环病毒。利用PCR分段扩增序列方法,并测定了该PCV2长春地区分离株的全基因组序列,比较了该株病毒与Gene Bank中其他分离株序列间的同源性和遗传进化关系,该毒株与欧洲毒株同源性最高。将该分离毒株的部分结构基因截短,利用大肠杆菌表达系统,对PCV2结构基因进行了表达,证明了表达蛋白主要以包涵体形式存在。进一步应用尿素梯度洗涤法对包涵体进行纯化及复性。利用纯化复性的重组PCV2结构蛋白免疫家兔,制备了抗PCV2抗体。ELISA检测表明,制备的抗PCV2血清具有较高的抗体效价。为今后对PCV2的进一步研究奠定了坚实基础。
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