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研究目的: 喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)颈淋巴结转移的早期发现对喉鳞癌的治疗及预后至关重要,而目前人们对于相关的分子机理及分子标志的认识尚有限。本研究应用基因芯片技术,研究喉鳞状细胞癌隐匿性颈淋巴结转移相关的microRNA(miRNA)表达谱,筛选cN0期隐匿性颈淋巴结转移阳性的喉鳞癌及无转移者癌组织中差异表达的miRNA,为深入理解喉鳞癌发生淋巴结转移的分子机理,寻找相应的分子生物学标志提供理论基础和研究依据。 研究方法: 选取cN0期原发喉鳞状细胞癌患者6例,其中3例术后病理证实伴有颈淋巴结转移,3例无淋巴结转移,手术切除新鲜癌组织及对应癌旁正常黏膜组织标本,Trizol mirVana?miRNA Isolation Kit试剂盒提取总RNA,经Agilent Bioanalyzer2100电泳质检达芯片杂交质控要求后,采用Agilent Human miRNA Microarray version2 Kit,P/N G4470B芯片进行RNA样品标记及杂交实验,洗涤后的芯片经Agilent芯片激光扫描仪扫描后采用Feature Extraction软件提取数据,GeneSpring软件分析数据,以t-test检验筛选在转移组和无转移组中差异表达的miRNA(以P值<0.05和FC值>2为条件)。 研究结果: 共有13个miRNA在隐匿性转移性喉鳞状细胞癌中存在差异表达,相对于无淋巴结转移组,在有淋巴结转移组中有6个表达显著上调(FC>2,P<0.05),包括:hsa-miR-5194,hsa-miR-1305,hsa-miR-6717-5p,hsa-miR-1260b,hsa-miR-6131,hsa-miR-1288,其中hsa-miR-1288上调3倍以上;而表达明显下调(FC<0.5,log2<-1,P<0.05)的miRNA有7个,分别是:hsa-miR-31-3p,hsa-miR-144-5p,hsa-miR-4728-3p,hsa-miR-5196-5p,hsa-miR-149-5p,hsa-miR-486-5p,hsa-miR-4417。 研究结论: 基因芯片技术是一种快捷有效的高通量分析喉鳞状细胞癌淋巴结转移相关miRNA表达谱的检测方法。通过miRNA芯片分析,初步建立起转移性喉鳞状细胞癌差异性miRNA表达谱,共有13个miRNA:相对于无淋巴结转移组,6个miRNA在伴有颈淋巴结转移的喉鳞状细胞癌组织中表达水平显著上调,7个miRNA的表达水平显著下调。这13个差异表达的miRNAs可能成为喉鳞状细胞癌早期发生淋巴结转移的分子标志物。