【摘 要】
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RGS（regulator of G protein signalling）蛋白是近年来发现的一类对G蛋白信号转导过程起调节作用的蛋白.阿片受体是G蛋白偶联的七螺旋跨膜受体.研究比较瞬时表达的RGS4蛋白在瞬
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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RGS（regulator of G protein signalling）蛋白是近年来发现的一类对G蛋白信号转导过程起调节作用的蛋白.阿片受体是G蛋白偶联的七螺旋跨膜受体.研究比较瞬时表达的RGS4蛋白在瞬时表达和稳定表达μ受体的HEK-293细胞中对μ受体激活后腺苷酸环化酶抑制的影响,来验证RGS4蛋白的表达后的功能情况.比较RGS4蛋白在稳定表达μ阿片受体的HEK-293细胞中对μ受体激活后腺苷酸环化酶抑制的影响,来验证RGS4蛋白的表达后的功能情况.比较RGS4蛋白在稳定表达μ阿片受体的HEK-293细胞体系中和在共转染μ阿片受体的HEK-293细胞体系中对G蛋白信号途径的影响.并构建pEGFP-RGS4质粒,通过荧光显微镜技术对RGS4蛋白的分布进行细胞内定位.从酶切结果看,目的基因RGS4片段已经联入pEGFP-C1中,将此质粒转染至HEK-293细胞中,通过荧光显微镜证实RGS4蛋白主要以胞浆分布为主.用放射性蛋白竞争结合法分析AC活性,在瞬时表达μ受体和RGS4蛋白的空HEK-293细胞体系中,RGS4可显著影响G蛋白的信号转导,从而对AC活性产生影响;而在稳定表达μ受体的HEK-293体系中,从目前结果看,RGS4对G蛋白信号通路的影响不明显.
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