【摘 要】
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已有的研究结果表明LFY类基因为花分生组织决定基因,它们在开花转化和激活花器官决定基因的表达上有着关键性的作用。本实验通过克隆拟南芥三个不同长度的LFY启动子连接于报
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已有的研究结果表明LFY类基因为花分生组织决定基因,它们在开花转化和激活花器官决定基因的表达上有着关键性的作用。本实验通过克隆拟南芥三个不同长度的LFY启动子连接于报告基因GUS上游后转化烟草,进一步研究LFY启动子异源表达的模式特征。
关于拟南芥PYK10基因及其启动子的研究见诸于文献报道的不多,综合前人的研究结果得到一个初步的结论。PYK10在拟南芥刚萌发幼苗的各器官均有表达,在成熟植株中在根中特异表达,但其莲座叶在受到伤胁迫或者微生物侵害时,PYK10的表达量也会有诱导性的表达。本实验通过克隆二个不同长度的PYK10启动子片断,转化烟草后进行PYK10启动子的深入研究。
本实验获得Plfy15,Plfy20,Plfy25,Ppyk8,Ppyk14启动子转化株系各30株共150株烟草栽培苗,在经过四个多月的室外营养生长后,大部分开花,通过对各器官及组织的GUS染的色分析和显微解剖观察,得到了很多新的发现：
1.Plfy15,Plfy25在烟草幼小花蕾的各个器官都有很高的活性,在成熟花朵中,它们都在花梗,花萼,花瓣中有着很高的活性。Plfy15在柱头中检测到了活性,而Plfy25在花丝中存在着活性。在植株的其它器官如根,茎,叶中,二个启动子都没有活性。
2.在烟草完成开花转化后,Plfy25启动子在茎尖分生组织的花原基特异表达。
3.Ppyk8启动子在根中特异表达,但其在烟草叶片中存在伤诱导表达活性。
4.Ppyk14启动子在根中没检测到活性,但在叶片中存在伤诱导表达活性。
通过对LFY启动子的研究,本实验找到了在花器官大多数组织中高表达的器官特异性启动子Plfy15和Plfy25,从而为本实验室的无花植物基因工程技术的创建和应用奠定了基础；通过对PYK10启动子的研究,本实验验证了PYK10启动子在其它植物中的活性,并且进一步明确了PYK10启动子的伤胁迫诱导特性。
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