2005-2006年济南地区淋球菌耐药性检测及质粒分析

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目的: 检测济南地区淋球菌(NG)对4种抗生素的最小抑菌浓度(MIC),同时进行质粒抽提和电泳分析。 探讨:1.济南地区淋球菌对5种抗生素的耐药状况,2.济南地区淋球菌的质粒谱型。 方法: 1.收集淋病患者尿道或宫颈的脓性分泌物,进行淋球菌培养、鉴定为淋球菌后置牛奶管-70℃冷冻保存备用。 2.用琼脂糖稀释法,采用WHO推荐的标准,检测淋球菌对四环素、环丙沙星、头孢曲松、大观霉素的最小抑菌浓度(MIC)和质粒介导的高度耐青霉素菌株(PPNG)。 3.用小量碱裂解法,对淋球菌进行质粒抽提,并对提取质粒进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察质粒谱型。 4.对照淋球菌的耐药谱与质粒谱之间是否有对应关系,并探讨与其它地区间的差异。 结果: 1.对2006年度收集的49株淋球菌进行了MIC检测,PPNG菌株6株(12.24%),TRNG 5株(10.20%),环丙沙星耐药100%,大观霉素、头孢曲松未发现耐药菌株,但头孢曲松敏感性下降。 2.对2005年收集的99株淋球菌(耐药检测已于去年由他人完成);和2006年度49株株淋球菌的质粒进行了检测。最终有70株得到可靠结果,质粒检出率91%,共检测到4种分子量质粒,8种质粒谱型,以4.2kb+5.4kb、4.2kb+7.4kb、4.2kb+5.4kb+39.5kb为主,分别占38.58%、20.00%、15.71%。表现有地域特异性。 3.将淋球菌的耐药谱与质粒谱进行了对照研究,未发现某种一一对应关系。 结论: 1.同样资料来源和相同实验条件上年度有99株淋球菌,PPNG阳性36.36%;TRNG阳性23.23%;环丙沙星耐药98.99%;头孢曲松、大观霉素两年均未发现耐药菌株。比较两年度实验结果,可见PPNG、TRNG阳性明显下降;而环丙沙星、头孢曲松、大观霉素耐药状况无显著性差异。 2.与国内其它地区耐药状况对比,除个别地区外,整体差别不大;比世界上发达地区耐药严重,但要好于亚非不发达地区;显示了淋球菌耐药检测和规范用药的重要性。 3.同时存在5.4kb和7.4kb两种分子量耐药质粒。与多数地区耐药质粒谱有差异,而与上海地区相似。由此可见,不同地区、不同时期淋球菌质粒谱型有各自的特点,了解其变化有助于区别流行株和对耐药菌株进行跟踪,从分子水平上为菌株的流行病学研究提供信息。 4.最初的淋球菌质粒文献中证实某种分子量耐药质粒,对应耐某种抗生素,但本实验中并未得到一一证实,据此尚不能推断某一种质粒谱与某种抗生素耐药的确切关系,进一步的研究有待通过质粒的转化、接合与消除试验加以证实;甚至可对耐药质粒进行基因序列的测定。
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