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第一部分 hMSC的培养及HGF基因修饰后的鉴定
目的:原代分离培养人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cell，hMSC），转染携带人肝细胞生长因子基因的腺病毒（adenovirus-hepatocyte growth factor，Ad-HGF）之后进行鉴定。
方法:利用Percoll液分离出骨髓单个核细胞，贴壁培养72h后弃上清，继续培养直至细胞生长汇合率达到80％，传代或冻存。取第3代hMSC在无血清条件下转染Ad-HGF，2h后补加血清，继续培养48h。光镜下观察比较转染前后的细胞形态，并通过流式鉴定hMSC/Ad-HGF的表面标志物，酶联免疫吸附分析（enzyme-linked immunoadsorption assay，ELISA）测定HGF表达量。
结果:成功分离培养原代hMSC；HGF基因修饰前后，均为成纤维样细胞形态；流式测定hMSC/Ad-HGF阳性表达CD44，CD29，而CD31，CD34，CD45和CD14均表达阴性，与hMSC细胞表型一致；ELISA测得hMSC/Ad-HGF的HGF表达量显著高于hMSC（P<0.001）。
结论:经HGF基因修饰的hMSC，维持了原有的细胞形态及特异性细胞表型，且高表达HGF。
第二部分 HMSC/Ad-HGF促进鸡胚血管新生
目的:评价hMSC/Ad-HGF的促血管新生效应，并初步分析其机理。
方法:利用Ad-HGF转染hMSC，将细胞接种于鸡胚绒毛膜尿囊膜，与α-MEM、同代hMSC及bFGF比较，3天后计血管数量。RT-PCR检测hMSC表达bFGF、VEGF、血管生成素-1和血管生成素-2的水平。
结果:四组中hMSC/Ad-HGF促血管生成能力最强，hMSC和bFGF组相近，α-MEM组最低。RT-PCR结果显示，hMSC和hMSC/Ad-HGF均表达多种促血管生成相关细胞因子，而HGF转染后表达水平升高。
结论:经HGF基因修饰的hMSC具有较强的促血管新生的功能，本研究为缺血性疾病的治疗提供了有益的信息。
第三部分 hMSC/Ad-HGF促进大鼠肢体局部缺血的血管新生
目的:评价hMSC/Ad-HGF体内促血管新生效应，并探讨其作用机制。
方法：建立大鼠局部肢体缺血模型，利用携带HGF基因的重组腺病毒感染hMSC，将细胞通过肌肉注射接种于缺血区，21天后进行激光多普勒灌注成像测定，H&E染色和免疫组化评价骨骼肌微血管密度。利用MTT、Transwell及内皮细胞体外管状结构形成实验，评价hMSC/Ad-HGF对血管内皮细胞的体外增殖、迁移及成管状能力的影响。
结果:21天后hMSC/Ad-HGF和hMSC组血流灌注水平明显高于对照组（P<0.01），前者接近假手术组，显著高于hMSC组（P<0.05）。组织学分析表明，每高倍视野肌肉组织中微血管数量以hMSC/Ad-HGF组最高，假手术组和hMSC组次之，对照组最低（P<0.01）。hMSC/Ad-HGF培养上清可明显促进ECV304细胞的增殖，刺激作用高于表皮生长因子（20ng/ml，P<0.001）；促进细胞跨膜迁移和管状样结构形成，强于表皮生长因子。
结论：hMSC/Ad-HGF可促进血管内皮细胞的增殖、迁移及血管结构重建，从而引发血管新生效应。